Пугачева сильно похудела – Telegraf.by
Какие нынче есть актуальные новости шоу бизнеса? Согдасно последним наблюдениями поклонников, стало очевидно, что Алла Пугачева сильно похудела. Это отчетливо видно на фотографиях. Близкие признаются, что вторую молодость подарила ей диета, которую рекомендовали медики после операции на сердце. Алла Борисовна стала, очень мало есть. Жирную пищу исключила из рациона навсегда. Результат на лицо.
Внешние изменения произошли с Примадонной еще прошлым летом. Слухи распространялись о том, что она решила похудеть перед очередной пластической операцией. Диета Пугачевой была простым методом, которая заключалась в употреблении каждый день кофе и кусочка сыра.
С ее слов после употребления такой пищи, она стала чувствовать себя гораздо лучше. В течение двух лет, питается преимущественно рыбой, употребляя ее маленькими порциями. Это камбала, лукарь и пеламида. Ест утром, а обед и ужин старается избегать. Устраивает разгрузочные дни, в результате которых держит вес в пределах нормы. Ест только свежие овощи и фрукты. Эти продукты не только насыщают организм витаминами, но и очищают его. С помощью такой диеты она распрощалась с лишним весом на 30 килограмм.
Пугачева сильно похудела, и теперь выглядит как девочка. Поэтому пришлось сменить гардероб. Оставив позади наряды с бесформенными черными балахонами, на смену которых пришли модные леггинсы и туники весенних оттенков, которые изящно подчеркивают ее талию. Певица выходит на сцену в коротких юбках, которые откровенно демонстрируют ее стройную фигуру. Благодаря их кукольному фасону, они подчеркивают ее стройные ноги. И говорят, она воспользовалась услугами пластических хирургов. Несмотря на страх и запреты медиков.
Возможно, похудеть ей рекомендовали пластические хирурги, которые опасались по поводу хирургических вмешательств в организм знаменитой певицы. Ведь перед операцией на лице врачи рекомендуют, сбросить лишний вес. Эффект от этого бывает намного лучше.
После операции на сердце она отказывалась ложиться под нож пластических хирургов. Что же послужило причиной, того, что Примадонна в корне сменила свой облик. Возможно дело в молодом супруге Максиме Галкине.
Лолита Милявская рассказала, как похудела на 17 килограммов
Поклонники певицы Лолиты Милявской отмечают преображение женщины — после развода она похорошела и значительно сбросила вес.
Как пишут «Невские новости», дизайнер певицы Игорь Гуляев отмечает, что талия Милявской уменьшилась в несколько раз.
Поклонники певицы в какой-то момент даже начали беспокоиться о том, что Милявская худеет из-за стресса, который пережила после развода с фитнес-тренером Дмитрием Ивановым, расставание с которым сопровождалось шумихой в СМИ.
Однако сама Лолита успокоила поклонников — по словам женщины, похудеть ей помог отказ от соли и мяса. Но главный секрет, по словам самой певицы, — следовать индивидуальным советам врача-эндокринолога. Сама женщина так и поступила.
— К 40–45 годам одним из главных людей в жизни любой женщины должен стать врач-эндокринолог, искать которого надо по слухам, а не докторским степеням, — заявляет артистка.
Ранее пользователи социальных сетей отметили преображение другой популярной актрисы — 61-летняя Лариса Гузеева выложила фотографию в своем аккаунте в Instagram, лаконично заметив в подписи к снимку, что продолжает «стремиться к идеалу». Как пишет «Царьград», секрета похудения актриса не выдает, однако лето и начало осени у женщины выдались крайне насыщенными в плане работы — Гузеева активно участвовала в съемках программ. Вероятно, что такой активный образ жизни поспособствовал изменениям во внешности женщины.
Зарубежные знаменитости тоже часто удивляют зрителей кардинальными трансформациями.
Так, недавно портал «Экономика сегодня» рассказывал о дочери певца Оззи Озборна, Келли Осборн, которая похудела на 30 килограммов. Девушка обрела новую форму после прохождения курса реабилитации от алкогольной зависимости в 2017 году.
— Я больше не хочу быть толстой, пьяной неудачницей. Я хочу быть стройной победительницей, — заявила девушка в интервью.
Келли начала вести здоровый образ жизни, много заниматься спортом, а также сделала операцию по уменьшению желудка.
Проблема избыточного веса беспокоит многих людей, и ученые продолжают искать пути ее решения. Недавно специалисты из США разработали препарат для борьбы с ожирением. Как пишет «360», сейчас продолжают проводится исследования нового вещества, однако испытания на группе из 60 человек уже показали позитивный результат.
Читайте также: «Великая красотка»: поклонники Пугачевой восхитились ее помолодевшим видом
Поделиться в FBПоделиться в VKПоделиться в TWПоделиться в OK
Ясновидящая о Пугачевой: «Ее дети — главный проект 2020 года» – Звезды
Галина Янко составила индивидуальный прогноз для Примадонны
Галина Янко
16 января 2020 13:30
Алла Пугачева
Фото: Instagram.com/alla_orfey
Алла Пугачева показала поклонникам свое свежее фото. «Встречайте Старый Новый год с хорошим настроением, и все Старое обНовится» (орфография и пунктуация автора сохранены, — прим. WomanHit.ru), — подписала она пост. Поклонники заметили, что сама Примадонна действительно выглядит по-новому — молодо и подтянуто. Пока поклонники обсуждают, как 70-летней певице это удается, ясновидящая и таролог Галина Янко рассказала WomanHit.ru, что ждет Аллу Борисовну в этом году.
«Самая яркая и эпатажная личность на нашей эстраде. Сколько бы она ни делала прощальных туров, конца ее карьеры ждать не стоит. В новом году она еще раз проедет по России с маленьким туром и опять порадует поклонников своими концертами. Карты показывают ее долгожителем, 90 лет она вполне может отметить на сцене», — начала Галина.
«Год для нее в целом спокойный. Вижу, что она сильно переживает по поводу собственного здоровья, так как все же у нее наблюдаются небольшие проблемы с сердечно-сосудистой системой.
Волнуется она не столько за себя, сколько за своих детей. Она хочет подольше побыть на этой Земле, чтобы успеть передать все свои знания и умения. Ее дети — главный проект следующего года», — считает ясновидящая.
«В планах у нее есть и открытие своего театра. Не могу сказать, что это будет похоже на театр Кадышевой или Бабкиной. Да, это какой-то проект, где она объединит свою творческую деятельность и свои умения и таланты с творчеством Максима Галкина. Направление деятельности сложно обозначить, но то, что это будет ярко и успешно — 100%. Год у нее денежный, и все вложения, которые она будет делать, принесут ей существенные дивиденды. Кроме творчества, ее заинтересует новый бизнес, который она откроет в середине следующего года. Он не будет связан с ее основным видом деятельности. Скорее всего, она выступит инвестором», — говорит таролог.
«Дети у нее растут в любви и благополучии. То, что они одаренные, можно и не обсуждать. Следующий год она также будет стараться дать им больше знаний и занимать их различными формами обучения максимально. Она считает так: пусть лучше у них не будет времени совсем, тем самым они потом смогут в жизни добиться максимальных успехов. Кстати, она не сторонник того, чтобы ее детей брали куда-либо, только потому что это ее дети. Ей хочется, чтобы их оценивали по заслугам в целом. В ее семье идет пополнение, идет деторождение. Лично у нее нет планов заводить еще детей, а вот кто-то из членов подарит еще одного талантливого наследника династии Пугачевой», — заключила Янко.
Диетолог раскрыла секрет похудения Разина по «диете Пугачевой» из селедки
Алексей Заякин
Анастасия Морылева
Как рассказывал продюсер, он стал вместо мяса употреблять селедку.
Диетолог рассказала, как Разин похудел на 43 килограмма/http://globallookpress.com/
Врач-диетолог, гастроэнтеролог Нурия Дианова в беседе с корреспондентом портала Teleprogramma.pro объяснила, как 56-летний продюсер группы «Ласковый май» Андрей Разин, как он утверждает, похудел на 43 килограмма. По его словам, он заменил мясо на селедку, что и стало путем к успеху. Рецепт ему подсказали врачи певицы Аллы Пугачевой.
«Надо помнить, что ему уже 56 лет. В таком возрасте рекомендуется снижать употребление красного мяса. Если мы говорим о селедке, то надо помнить, что она в лечебном питании присутствует. Она должна быть вымочена в молоке. Дают ее один раз в неделю. И чаще всего стараются это делать в первой половине дня. Норма — 50–70 граммов. То есть совсем немного».
Нурия Дианова
Как добавила диетолог, селедка — прекрасная рыба, если она, конечно, попадает на стол не соленой, а, например, мороженной.
«Ее можно приготовить запеченной или на пару. То же самое со скумбрией. Эта морская рыба богата жирами. Если есть возможность уйти от красного мяса и перейти на рыбу, то это хорошо. Мы сохраняем высококачественный белок в определенном количестве», — сказала специалист.
Андрей Разин опубликовал уникальные снимки молодого Михаила Горбачева с женойФотографии в единственном экземпляре хранятся в музее при отеле продюсера.
Как отметила Дианова, только на слабосоленой селедке похудеть не получится, потому что это все же соленый продукт.
«Он так и не иначе будет задерживать жидкость. Поэтому нюансы кроются в деталях. Виды кулинарной обработки имеют значение. Вообще, идеальная потеря веса не более четырех килограммов в месяц. Кожа должна подтянуться. Не должны образоваться камни в почках и желчном пузыре», — заявила Дианова.
Справка Teleprogramma.pro
Нурия Дианова — главный диетолог центральной дирекции здравоохранения – филиала ОАО «РЖД», врач-диетолог НУЗ ЦКБ № 2 им. Н.А. Семашко ОАО «РЖД», гастроэнтеролог.
Расист или половой маньяк? – МК В Новом Свете
Сходство пока тоже поверхностное, и строй, который нынче у нас на дворе, известен среди знатоков общественно-политических формаций как «мягкий тоталитаризм». Вот одно из его недавних проявлений, тоже довольно вегетарьянское, но типичное и противное.
Во вторник на прошлой неделе 21-летний Роберт Аарон Лонг застрелил 8 человек и ранил еще нескольких в трех массажных салонах Большой Атланты. Вечером того же дня полиция остановила его «Хендай» на автостраде Interstate 75, когда он направлялся во Флориду. Если верить информации «Вашингтон пост», предположительно Лонг собирался продолжить отстрел там.
Мотивы стрелявшего пока известны лишь из выступлений местных полицейских начальников на пресс-конференциях. Они сообщили, что Лонг не отрицал содеянного и объяснил его тем, что, будучи истовым христианином, он желал жить целомудренно, но был снедаем похотью, регулярно уводившей его с пути истинного в бордель или заставлявшей впиваться глазами в порнуху. Он отстреливал «массажисток», чтобы уничтожить источник соблазна.
Показаний арестанта недостаточно, чтобы принять его версию за чистую монету. Для ее проверки у нас существуют расследования и суды. Но, как сообщила «Нью-Йорк таймс» в своей первоначальной статье о трагедии, версию губительной похотливости и сопутствующих ей терзаний Лонга подтвердили и его родственники и приятели.
«Вашингтон пост» писала в своей первоначальной статье, что, по словам знавших его, убийца был «религиозным маньяком», но одновременно сексуальным и бывал в двух из трех пострадавших салонов. Он объяснил соседям по квартире, что ходит туда, поскольку это самый безопасный и бесхлопотный способ удовлетворения ненавистной похоти, а не из-за того, что там работают азиатки.
В пятницу «Нью-Йорк таймс» напечатала вторую новостную статью, в которой сообщала, что Лонг лечился в клинике от сексуальной зависимости и что в следующий раз он планировал побоище на каком-то объекте порноиндустрии.
Особые чувства к азиаткам Лонг отрицал, а других доказательств его ненависти к уроженцам Азии пока не появилось. Но это не имело значения.
Поскольку американские СМИ живут ныне по заветам критической расовой теории (КРТ), для выводов вышесказанного было достаточно. Убийца был белым, убитые были азиатками, чего вам еще нужно? Правда, Лонг застрелил и двух белых, но эта деталь нарушает стройность единственно правильного толкования трагедии, поэтому убитые белые не считаются. Равно как и тяжело раненный латиноамериканец.
Как пишет Эндрю Салливан, один из моих любимых либералов (к которым я в последнее время положительно воспылал, потому что по сравнению с новыми властителями наших дум они почти нормальные), согласно КРТ, «в Америке все движимо белой расистской ненавистью того или иного сорта».
«Нью-Йорк таймс» поначалу ограничилась фактами, но к утру пятницы напечатала 9 (девять) других материалов, в которых утверждалось, что речь шла об очередном «преступлении ненависти» против азиатов, движимой белым расизмом и/или женоненавистничеством. Один заголовок гласил: «Как расизм и сексизм переплетаются и терзают американок азиатского происхождения».
«Вашингтон пост» переплюнула свою главную соперницу, к пятнице поместив вдогонку первой фактической статье 16 (шестнадцать!) отдельных материалов, которые толковали побоище как «белое расистское антиазиатское преступление ненависти».
Один обозреватель газеты ругнул ее за то, что она напечатала первую статью, излагавшую заявления полиции, поскольку они отвлекали внимание от «настоящих» мотивов убийцы.
«Нью-Йорк таймс» не дремала и опубликовала еще один якобы новостной материал, доказывавший, что трагедия в Атланте свидетельствует о наличии в США структурного расизма и сексизма.
Доказательства представили левые активисты.
Заголовок на сайте телекомпании Эн-би-си сетовал на «Американскую проблему сексуализированного расизма». Статья газеты «Ю. Эс. Эй. Тудей» задавала вопрос: «Кому решать, что такое расизм, ненависть? Стрельба в Атланте возобновила дискуссию о белом насилии, привилегии». Заголовок на сайте Си-эн-эн гласил: «В каком-то смысле несущественно, признает ли убийца из салонов Атланты свои расистские побуждения».
Я обратил внимание на заголовок сайта «Корень» (The Root) «Белизна – это пандемия». Ежевечерний телекомик Тревор Ноа, импортированный из ЮАР, высосал из пальца следующее утверждение: «Убийца из Атланты винил в своих проблемах людей конкретной расы и потом убил их по этой причине. Если это не расизм, термин ничего не значит».
Вообще-то когда массовые убийцы движимы ненавистью к кому-то, обычно они не делают из этого секрета. Мерзавец, расстрелявший синагогу в Питтсбурге, как сообщают, сказал открытым текстом, что хотел «убивать евреев». Расстрелявший «Волмарт» в Эль-Пасо объяснил, что планировал разделаться с мексиканцами. Не скрывал своих расистских настроений и урод, открывший огонь по Черным прихожанам в Чарльстоне.
Лонг же подобные мотивы отрицает, и доказательств обратного пока никто не доставил. Тем не менее студенты и профессора Гарварда незамедлительно получили следующую емелю: «Многие из нас проснулись вчера и услышали жуткое известие о зверском и кровавом нападении в Атланте, которое было последним в череде учащающихся актов насилия против азиатов, американцев азиатского происхождения и уроженцев островов Тихого океана».
Руководители вуза, в прошлом признавшегося, что он подвергал азиатов дискриминации, писали дальше, что у насилия по отношению к азиатам в США давняя история. Они упомянули запрет на иммиграцию из Китая и «нативистскую риторику», усилившуюся во время пандемии (речь о том, что при Трампе китайский вирус называли «китайским вирусом», каковым подлец таки является.
Этот довод звучит в последние дни постоянно: Лонг стрелял в азиаток с подачи Оранжевого).
Главная антирасистка «Нью-Йорк таймс» Николь Ханна-Джонс твитнула, что «вчерашний расстрел и отвратительный рост антиазиатского насилия порождены больным обществом, в котором подогревается и нормализуется национализм».
Главный антирасист Америки Ибрам Кенди твитнул: «Протягиваю руку американцам азиатского происхождения, на которых обрушилась эта смертоносная волна антиазиатского террора. Их борьба – это моя борьба. Мы боремся против расизма и Белого расистского внутреннего террора!».
Мне особенно понравилась «моя борьба».
Я могу продолжать до утра, но устал цитировать демагогов. Закончу экскурсом в статистику. Каждый день сейчас слышишь, что нападения на азиатов в США умножились за один вирусный год на 150%.
Это верно, хотя, если не в процентах, число нападений выросло всего до… 122 инцидентов на страну с населением 330 миллионов, 19 млн из которых являются азиатами. И первое место по нападениям на азиатов занимают Черные, а не Белые!
В течение 2020 года за «преступления ненависти» против азиатов в городе Нью-Йорке были арестованы 20 человек. 11 из них были афроамериканцами, 2 – чернокожими гишпанцами, 2 – Белыми и 5 – белыми гишпанцами. Большинство Черных нападавших были женщинами.
А кто вообще больше всех грешен по части «преступлений ненависти»? Первое место по стране занимают афроамериканцы с 23,9%, которые составляют лишь 13% населения.
Азиаты, несмотря на нынешний визг, отнюдь не главные жертвы таких нападений. Тут первенство прочно принадлежит евреям и ряду других меньшинств.
«Роснефть» расширяет деятельность по сохранению водных ресурсов | Москва
В 2020 году «Роснефть» выпустила свыше 65 млн мальков
МОСКВА, 22 марта, ФедералПресс.
Компания максимизирует рациональное использование воды.
Сегодня отмечается Всемирный день воды, учрежденный ООН в 1993 году для привлечения внимания населения планеты к проблеме доступа к безопасной воде.
Компания «Роснефть» свыше 10 лет является участником Глобального договора ООН, а в 2018 году она подтвердила приверженность 17 целям ООН в области устойчивого развития, среди которых цели № 6 «Чистая вода и санитария», № 12 «Ответственное потребление и производство». Для поддержки реализации указанных целей в 2020 году «Роснефть» разработала концепцию экологического развития до 2030 года, включающую подходы по рациональному использованию водных ресурсов.
В ходе своей деятельности «Роснефть» и ее дочерние предприятия стремятся рационально использовать водные ресурсы. Для этого в компании осуществляется программа повышения экологической эффективности, предусматривающая увеличение доли оборотной и повторно-последовательно используемой воды, экологически безопасное обращение с попутно добываемыми пластовыми водами и внедрение современных систем очистки сточных вод.
Также «Роснефтью» выполнены или реализуются проекты по модернизации очистных сооружений на ее предприятиях. В частности, на «Башнефть-Уфанефтехиме» успешно введен в эксплуатацию крупнейший в Евразии комплекс биологических очистных сооружений мощностью 84 тыс. кубометров в сутки с применением технологии мембранного биореактора. Он позволил значительно улучшить качество очистки сточных вод, а также увеличить использование очищенной воды в технологических процессах, что в 2,5 раза снижает объем ее забора из водных объектов.
Для сохранения биологического разнообразия водных ресурсов в прошлом году в «Роснефти» были проведены работы по выпуску в естественную среды свыше 65 млн мальков. Здесь в наибольшей степени отличились «РН-Юганскнефтегаз», «Таас-Юрях Нефтегазодобыча», Сызранский, Куйбышевский и Новокуйбышевский нефтеперерабатывающие заводы.
Всего же в 2020 году свыше дочерних предприятий «Роснефти» приняли участие в мероприятиях, направленных на воспроизводство водных биологических ресурсов в целях сохранения и увеличения рыбной фауны.
Фото: pxhere.com
Перепрограммирование скелетных мышц при раке груди независимо от истории лечения или молекулярного подтипа опухоли
Информация для пациентов
Проведение исследований с участием людей в Университете Западной Вирджинии руководствуется принципами, изложенными в Этических принципах и рекомендациях по защите людей исследований (Отчет Бельмона) и выполняется в соответствии с политикой и правилами Министерства здравоохранения и социальных служб. Процедуры в этом исследовании были рассмотрены и одобрены Советом по институциональному обзору WVU (IRB).В общей сложности 71 хирургическая пациентка предоставила информированное согласие на включение в это исследование (контроль n = 20; BC n = 51). Информированное письменное согласие было получено от каждого субъекта или его опекуна. В это исследование можно включить людей, если они (1) имеют операбельное заболевание или проходят диагностическую биопсию, (2) диагностированы или подозреваются в наличии инвазивной аденокарциномы груди, (3) закончились. 21 год и (4) предоставили информированное согласие.Женщины с РМЖ предоставили биопсию большой грудной мышцы интраоперационно во время мастэктомии, а пациенты контрольной группы предоставили образцов большой грудной мышцы во время других операций на груди. Женщины с РМЖ были разделены на четыре молекулярных подтипа на основании иммуногистохимического окрашивания их первичных опухолей: ERPR ( n = 20), HER2 ( n = 9), TN ( n = 11) или TP ( n). = 11).
Информация об ИМТ в разные моменты времени была собрана у 12 контрольных и 50 пациентов с РМЖ.
Среднее количество дней наблюдения за согласованным пациентом составляло 170 ± 214 (медиана контроля = 170, медиана ERPR = 36, медиана HER2 = 146, медиана TP = 140, медиана TN = 180). Подробный анализ состава тела был проведен у 8 контрольных и 35 пациентов с РМЖ с использованием шкалы биоэлектрического импеданса (Tanita: модель SC-240). Уровни сывороточного альбумина были получены у 3 контрольных и 49 пациентов с РМЖ (ERPR n = 18; HER2 n = 9; TP n = 11; TN n = 10). Для анализа RNA-Seq использовались биопсии от 10 контрольных и 33 пациентов с РМЖ (ERPR n = 10; HER2 n = 5; TP n = 9; TN n = 9).
В ходе отдельного анализа деидентифицированных электронных медицинских карт (EMR) женщин-пациентов с РМЖ для расчета ИМТ были получены данные о массе тела и росте стоя для 5201 человека. В этой популяции окончательные анализы были завершены у 3001 пациента, у которого было по крайней мере два измерения веса в дополнение по крайней мере к одной записи для сывороточного альбумина.
Секвенирование РНК
Большой грудной мышцы биопсий получали во время операции и хранили в реагенте для стабилизации РНК (Invitrogen, Thermo Fisher, Сан-Хосе, Калифорния) в течение ночи при 4 ° C, а затем при 80 ° C до обработки.РНК выделяли, оценивали на качество и использовали для создания библиотек для RNA-Seq, как сообщалось ранее 15 . Завершенные библиотеки секвенировали на одной дорожке HiSeq 1500 с считыванием PE50 п.н., примерно с 15 миллионами считываний на образец. Впоследствии, Salmon был использован для оценки численности на уровне транскриптов с набором gcBias и seqBias, а также libType A 33 с использованием сборки генома GRCh48. От 5 до 10% считываний в каждом образце невозможно было сопоставить, и они были исключены из анализов, представленных здесь.Оценки численности на уровне транскриптов были сведены к уровню гена с использованием tximport 34 . Полученная матрица подсчетов была масштабирована до размера библиотеки с использованием edgeR 35 и отфильтрована для удаления генов без значения количества на миллион (CPM)> 1 из 3 или более образцов. Логарифмически преобразованные значения CPM для 10000 генов с наибольшей дисперсией были использованы в качестве входных данных для иерархической кластеризации с использованием gplots 36 . Значения CPM всех генов с CPM> 1 по крайней мере в трех выборках были масштабированы и логарифмически преобразованы перед вычислением матрицы расстояний, которая затем была введена для классической MDS с k = 3 и визуализирована в трех измерениях с использованием автомобиля 37 .Затем эту трехмерную матрицу расстояний (3D-MDS) использовали в качестве трех переменных ответа, представляющих экспрессию гена в многомерном регрессионном анализе для оценки статистических взаимосвязей между клиническими параметрами и общей экспрессией гена. Анализ дифференциальной экспрессии генов проводили с использованием DESeq2 38 . Как многомерный регрессионный анализ, так и анализ дифференциальной экспрессии дополнительно описаны ниже в разделе « RNA-Seq и клинические корреляты » в разделе «Статистический анализ».Мощность была определена post hoc и составила 88% с использованием RnaSeqSampleSize 39 с 1000 повторениями, f = 0,1 и rho = 2.
Протеомика
Подготовка образца
Большой грудной мышцы биопсий из n = 5 пациенток с РМЖ со сверхэкспрессией HER2 / neu и n = 5 контрольных пациенток с хирургическим вмешательством груди были приобретены во время операции и сохранены в РНК-позже при -80 ° C до обработки 40 .
Образцы биопсии мышц весом приблизительно 50 мг были отправлены на сухом льду в лабораторию масс-спектрометрии (МС) и протеомики в Гарвардском университете и обработаны в соответствии с установленными протоколами 41,42 .
Вкратце, биопсии лизировали в микропробирках Covaris ® microTUBE-15 (Woburn, MA) с буфером Covaris ® TPP, используя прибор Covaris S220 Focused-Ultrasonicator с мощностью 125 Вт в течение 180 с с максимальной пиковой мощностью 10%. Затем образцы осаждали хлороформом / метанолом, фильтровали, восстанавливали, алкилировали и, наконец, расщепляли в течение ночи при 38 ° C в растворе, содержащем бикарбонат триэтиламмония и трипсин Promega ® Sequencing Grade. Затем расщепленные пептиды инкубировали с тандемными метками массы, используя разные метки для каждого образца.
ЖХ – МС / МС
Десять образцов были объединены в равных количествах и фракционированы на десять фракций. Жидкостная хроматография (ЖХ) –МС / МС выполнялась на Orbitrap Lumos (Thermo Fisher), оборудованном EASYLC1000 (Thermo Fisher). Пептиды разделяли на микрокапиллярной колонке с внутренним диаметром 100 мкм, заполненной сначала смолой C18 Reprosil (5 мкм, 100 Å, Dr. Maisch GmbH, Германия), а затем аналитической колонкой со смолой Reprosil (1,8 мкм, 200 Å, Dr. Maisch GmbH, Германия). Разделение достигалось за счет применения градиента от 5 до 27% ацетонитрила в 0.1% муравьиная кислота в течение 90 мин при 200 нл мин -1 . Ионизация электрораспылением была обеспечена путем приложения напряжения 1,8 кВ с использованием самодельного соединения электродов на конце микрокапиллярной колонки и распыления с пико-наконечников из плавленого кварца (New Objective, MA). LTQ Orbitrap Lumos работал в режиме зависимости от данных для методов масс-спектрометрии. Обзорное сканирование масс-спектрометрии выполнялось на орбитальной ловушке в диапазоне 395–1800 м / z с разрешением 6 × 10 4 , после чего выбирались 20 наиболее интенсивных ионов (TOP20) для столкновения. -индуцированная диссоциация (CID) в ионной ловушке с использованием окна ширины изоляции прекурсора 2 м / z , настройки AGC 10 000 и максимального накопления ионов 200 мс.
Однозарядные ионные частицы не подвергались CID-фрагментации. Нормированная энергия столкновения была установлена на 35 В и время активации 10 мс. Ионы в окне 10 ppm m / z вокруг ионов, выбранных для MS2, были исключены из дальнейшего отбора для фрагментации в течение 60 с. Те же ионы TOP20 были подвергнуты более высокой энергии столкновительной диссоциации (HCD) MS2 в части прибора Orbitrap. Ширина изоляции ионов фрагментов была установлена на 0,7 m / z, AGC была установлена на 50 000, максимальное время ионов составляло 200 мс, нормализованная энергия столкновения была установлена на 27 В и время активации 1 мс для каждого сканирования HCD MS2.
MS-анализ
Необработанные данные были отправлены для анализа в Proteome Discoverer 2.2 (Thermo Scientific). Назначение спектров МС / МС было выполнено с использованием алгоритма Sequest HT путем поиска данных в базе данных последовательностей белков, включая все записи из базы данных Uniprot_Human2016_SPonly, а также другие известные контаминанты, такие как кератины человека и обычные лабораторные контаминанты. Поиски секвестра HT проводили с использованием толерантности к ионам предшественника 20 м.д. и требовали, чтобы каждый N- / C-концы каждого пептида прилипали со специфичностью трипсиновой протеазы, при этом допуская до двух пропущенных расщеплений.ТМТ-метки из шести сплетений на N-концах пептида и остатках лизина (+229,162932 Да) были установлены как статические модификации, в то время как окисление метионина (+15,99492 Да) было установлено как вариабельная модификация. Частота ложных обнаружений (FDR) при присвоении спектров MS2 составляла 1% как на уровне белков, так и на уровне пептидов, что было достигнуто путем применения поиска в базе данных «цель-ловушка». Фильтрация производилась с помощью Percolator 43 (64-битная версия). Для количественной оценки было использовано окно 0,02 м / z , центрированное на теоретическом значении м / z каждого из шести репортерных ионов, и интенсивность сигнала, наиболее близкая к теоретическому значению м / z .
записано.Интенсивность репортерных ионов экспортировали с помощью Proteome Discoverer 2.2.
Вестерн-блоттинг-анализ
Большая грудная мышца биопсий от n = 13 пациенток с РМЖ и n = 10 контрольных пациентов с хирургическим вмешательством груди были заморожены и хранились при -80 ° C до обработки. Биопсии от n = 7 пациенток с РМЖ и n = 7 контрольных хирургических пациентов груди были отобраны из этого пула с использованием стратифицированной случайной выборки по группам пациентов (т.е., BC или CON) независимо от молекулярного подтипа пациента. Гомогенаты белков получали с использованием 5 мл измельчителя тканей Wheaton (DWK Life Sciences Inc., Миллвилл, Нью-Джерси, США) в растворе 20 мМ Трис-HCl (pH = 7,4), 150 мМ NaF, 1 мМ EDTA, 1% Triton X -100 и 10% глицерин. Гомогенаты очищали кратковременным центрифугированием, и концентрацию белка определяли количественно с помощью анализа белка DC ™ (Bio-Rad, Калифорния, США) в соответствии с протоколом производителя. Всего на лунку загружали 12 мкг общего белка и растворяли в гелях NuPAGE Novex 4–12% Bis – Tris (ThermoFisher Scientific).Белки переносили на нитроцеллюлозную мембрану, окрашивали по Понсо для оценки нагрузки, обесцвечивали, блокировали в 1 × трис-буферном физиологическом растворе (TBS), 0,1% Tween20, 5% молоке, затем инкубировали с первичным антителом в течение ночи при 4 ° C. Затем мембраны промывали перед нанесением соответствующего вторичного антитела (ThermoFisher Scientific) и снова перед нанесением субстрата для вестерн-блоттинга Pierce ECL (ThermoFisher Scientific). Относительную интенсивность полос оценивали количественно с использованием GE Amersham Imager 600 (GE Healthcare Life Sciences, Мальборо, Массачусетс, США).Количественный анализ был завершен с использованием двух параллельных блоттингов в качестве технических повторений. Окрашивание GAPDH и Ponceau представлено в качестве контроля загрузки, но не использовалось для нормализации данных денситометрии.
Первичные антитела разводили 1: 1000 в 1 × TBS, 0,1% Tween 20 и 5% молока и включали CKMT2 (ThermoFisher Scientific, # PA5-28591), COX7A1 (ThermoFisher Scientific, # PA5-67696) и GAPDH (Cell Signaling). Technology, Массачусетс, США, № 2118S). Полные необрезанные изображения блотов представлены на дополнительном рис.3.
год до н.э. Количественное определение АТФ в мышцах пациента
Большой грудной мышцы биопсий из n = 13 пациенток с РМЖ и n = 10 контрольных пациентов с хирургическим вмешательством груди были заморожены и хранились при -80 ° C до обработки как описано в разделе «Вестерн-блоттинг». Все доступные быстрозамороженные биопсии мышц были включены в анализ содержания АТФ. Содержание АТФ определяли количественно с использованием набора для определения биолюминесценции АТФ ENLITEN ® (Promega, Висконсин, США) в соответствии с протоколом производителя, используя рекомендованную производителем стандартную кривую для расчета абсолютного содержания АТФ по интенсивности люминесценции и FlexStation ® 3. Многорежимный считыватель микропланшетов (Molecular Devices ® , Калифорния, США).Содержание АТФ нормализовали по концентрации белка, количественно определяя с помощью анализа белка DC ™ (Bio-Rad, Калифорния, США).
BC-PDOX метаболический анализ митохондрий скелетных мышц
Эксперименты на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных WVU и проводились в соответствии с Руководством по этическому поведению при уходе за животными и их использовании в исследованиях. Мыши BC-PDOX были созданы путем имплантации фрагментов опухоли BC человека в жировую подушку молочной железы самки NOD.CG-Prkdscid Il2rgtm1 Wjl / SzJ / 0557 (NSG) мышей ( n = 6), как описано ранее 15 . Животных, несущих PDOX, умерщвляли приблизительно через 30 дней после достижения объема опухоли 200 мм. 3 . Контрольных самок мышей NSG аналогичного возраста ( n = 4) подвергали эвтаназии одновременно с животными, несущими опухоль, и ткани обрабатывались одинаково в обеих группах.
Сразу после смерти обе четырехглавые мышцы у каждой мыши были быстро удалены, и митохондрии IFM и SSM были изолированы отдельно согласно ранее описанным методам 44,45,46,47 , объединяя две мышцы для получения достаточного количества ткани для последующих применений.Митохондриальные изоляты хранили при -80 ° C до анализа. Содержание АТФ определяли количественно в каждой митохондриальной субпопуляции с использованием набора для определения биолюминесценции АТФ ENLITEN ® (Promega) согласно протоколу производителя с небольшими изменениями, как показано ниже. Изоляты митохондрий лизировали в 1% трихлоруксусной кислоте в течение 5 минут, затем разбавляли 1:10 в 0,1 моль л трис-основания -1 (pH = 7,8). Полученные образцы загружали в микропланшет с черными стенками в двух экземплярах и смешивали в соотношении 1: 1 с реагентом люцифераза / люциферин.Интенсивность люминесценции сразу считывали с помощью многомодового микропланшетного ридера FlexStation ® 3 (Molecular Devices ® , Калифорния, США). Значения интенсивности люминесценции были скорректированы и нормализованы для учета различных концентраций белка, которые были количественно определены с помощью анализа белка DC ™ (Bio-Rad, Калифорния, США).
Культура клеток
Все клеточные линии были получены от ATCC (Вирджиния, США), за исключением клеток EO771, которые были получены в рамках Соглашения о передаче материалов с Университетом Уэйк Форест.Клетки культивировали в среде Gibco DMEM (Thermo Fisher, Массачусетс, США) с добавлением 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (Atlanta Biologicals, Джорджия, США) и пенициллина / стрептомицина Gibco (Thermo Fisher) при 37 ° C с 6% CO 2. . Используемые клеточные линии включают Eph5-EV (иммортализованный нормальный эпителий молочной железы мыши), EO771 (мышиный люминальный BC), NF639 (мышиный BC со сверхэкспрессией HER2 / neu), HEK293 (эмбриональная почка человека) и C2C12 (мышиные миобласты).
Метаболический анализ кондиционированной среды (CM) in vitro
Клетки C2C12 помещали в чашки Agilent Seahorse XF24 (Agilent Technologies, Калифорния, США) и дифференцировали путем слияния в течение 3 дней.Между тем, клетки Eph5-EV, EO771, NF639 и C2C12 высевали при приблизительно 15% слияния в отдельные чашки диаметром 10 см в течение 72 часов. Затем 72-часовой CM удаляли из всех клеточных линий, центрифугировали при 1500 об / мин в течение 10 минут, а затем собирали супернатанты, разбавляли 1: 3 свежей питательной средой и наносили на дифференцированные клетки C2C12 в аналитических планшетах с морским коньком на 48 часов. ч ( n = 10 лунок на условие обработки) перед проведением протокола стресс-теста клеток Agilent Seahorse XF Cell Mito Stress Test в соответствии с инструкциями производителя.
In vitro CM PPAR-репортерные анализы
Клетки HEK293 были трансфицированы PPRE-h3b-eGFP 48 (Addgene # 84393) с использованием Invitrogen Lipofectamine 3000 (Thermo Fisher), отобранных с 500 нг мкл -1 Gibco генетицин ( Thermo Fisher) в течение 20 дней и сортировали в потоке для отбора клеток, экспрессирующих GFP. Полученную клеточную линию HEK293-PPRE-h3b-eGFP высевали при приблизительно 15% конфлюэнтности в 24-луночный планшет. На следующий день клетки были визуализированы с использованием Multi-Mode Reader BioTek Cytation 5 Cell Imaging (Agilent Technologies) для сбора исходной интенсивности GFP, и 72-часовой КМ из клеточных линий HEK293, Eph5-EV, EO771 и NF639 был нанесен на 24-луночный планшет с использованием отдельных лунок в качестве биологических повторений ( n = 6 лунок на условия обработки).Затем клетки инкубировали в CM в нормальных условиях культивирования в течение 24 часов, после чего измеряли интенсивность GFP с использованием тех же настроек визуализации, что и для исходной коллекции. Средняя интенсивность клеточного GFP на лунку была рассчитана с использованием программного обеспечения для считывания микропланшетов и имидж-сканера Gen5 (Agilent Technologies) после выравнивания фона и установления пороговых значений, которые были установлены одинаково для всех изображений.
Статистический анализ
Тенденции изменения веса пациентов с течением времени были рассчитаны для каждого отдельного пациента путем подгонки простой линии линейной регрессии к их весу на каждую дату в EMR, нормализованной таким образом, чтобы первая запись веса каждого пациента равнялась 100, в результате наклон, представляющий их приблизительный процент изменения веса тела за день.Девятнадцать пациентов были исключены из ежедневного изменения веса. Тринадцать из этих пациентов были исключены из-за ограниченного периода наблюдения (<15 дней). Затем было получено первое измерение альбумина каждого пациента, и скорость ежедневного изменения веса регрессировала по первым измерениям альбумина пациентов. Коэффициенты корреляции Пирсона и значения p были рассчитаны и нанесены на график с использованием ggpubr 49 в R v3.6.1 50 .
Логистический регрессионный анализ использовался для определения того, является ли сывороточный альбумин прогнозирующим для скорости изменения веса, соответствующей кахексии (т.е., <−0,027% в день для достижения 5% потери веса за 6 месяцев ( 1,2 ). Подгонка модели омнибуса оценивалась с помощью критерия хи-квадрат, а величина эффекта рассчитывалась с использованием псевдо- R 2 Нагелькерке. Был проведен тест кривой рабочих характеристик приемника (ROC) с предпочтительной чувствительностью и специфичностью> 0,7. Ни один пункт в ОКР не удовлетворял этим условиям. Подобранная модель логистической регрессии использовалась, чтобы предсказать, будет ли каждый пациент демонстрировать скорость потери веса, соответствующую кахексии, и эти прогнозы сравнивались с фактическими данными, чтобы создать матрицу неточностей для определения чувствительности, специфичности и положительной прогностической ценности.
Модель многомерной регрессии использовалась для оценки клинических данных относительно 3D-MDS, представляющих общую экспрессию генов скелетных мышц, полученных, как описано выше в разделе «РНК-секвенирование».
Каждая доступная клиническая переменная подвергалась регрессии на 3D-MDS, а соответствие модели оценивалось с помощью MANOVA и трассировки Пиллаи. Затем был применен прямой отбор для объединения переменных с наименьшими значениями p для следа Пиллаи в окончательную модель с учетом соображений окончательного выбора, включая статистическую значимость для MANCOVA с использованием следа Пиллаи и лямбда Уилкса, максимизацию статистики теста следа Пиллаи и минимизацию показателя Уилкса. статистика лямбда-теста.
Дифференциальный анализ экспрессии генов проводили с использованием DESeq2 35 . Входные данные состояли из оценок численности на уровне транскриптов лосося, суммированных до уровня гена с использованием tximport 31 . Было проведено два анализа дифференциальной экспрессии: один сравнивал группу пациентов с РМЖ и контрольными пациентами, а другой сравнивал пациентов РМЖ по подтипу с контрольными пациентами, при этом нулевая гипотеза отклонялась при FDR <0,10. Поскольку молекулярный подтип был единственной переменной, которая давала статистическую значимость для прогнозирования экспрессии гена в модели многомерной регрессии, описанной выше, никакие клинические характеристики не оценивались в анализе дифференциальной экспрессии.
Дифференциальный анализ экспрессии белка проводили с использованием DEP 51 . Значения экспрессии белков сначала фильтровали для удаления известных примесей и белков с отсутствующими значениями экспрессии в более чем одном образце на группу, затем нормализовали, а затем корректировали фон с использованием преобразования, стабилизирующего дисперсию. Оставшиеся пропущенные значения были вменены с использованием k-ближайшего соседа после определения того, что небольшое количество пропущенных значений, вероятно, пропущено случайным образом.Затем для вмененного набора данных был проведен анализ дифференциального выражения с использованием линейных моделей и эмпирической байесовской статистики, при этом нулевая гипотеза отклонена при FDR <0,05.
Входные данные для GSEA включали нормализованные подсчеты экспрессии генов для каждого пациента для всех генов с по крайней мере одним CPM по крайней мере у трех пациентов, с ранжированием, проведенным в GSEA с использованием ранжирования на основе «сигнал-шум». Референсные наборы генов включали все пути KEGG v7, доступные из базы данных молекулярных сигнатур 52 , с по крайней мере 15 генами в пути в нашем наборе генов для результатов RNA-seq и по крайней мере 10 генами в пути в нашем наборе генов для протеомики.Здесь представлены только пути, идентифицированные как обогащенные при q -значение <0,05. Исходные данные для анализов Enrichr 53,54 включали только список значимых DEG и белков. В Enrichr были запрошены все базы данных, особенно интересны ТФ ENCODE и ChEA Consensus для обогащения мишеней транскрипционного фактора, WikiPathways 2019 Human для анализа путей и базы данных 2018 из проекта Gene Ontology для анализа клеточных компонентов, биологических процессов и обогащения молекулярных функций. .Данные, представленные в этой статье, отражают анализы, проведенные в Enrichr с 15 мая по 15 июня 2019 года и в GSEA с 1 по 30 марта 2020 года. Анализ пути изобретательности (Qiagen, Германия) использовался для визуализации пораженных путей.
Содержание
АТФ в каждой митохондриальной субпопуляции в мышце PDOX сравнивали с контролем с использованием критерия суммы рангов Вилкоксона. Нулевая гипотеза была отклонена при p <0,05. В метаболических экспериментах CM использовали односторонний дисперсионный анализ для сравнения скорости потребления кислорода при производстве АТФ в процентах от базального потребления кислорода между четырьмя группами лечения CM с последующим двусторонним тестом Стьюдента t с поправкой Холма-Бонферрони. сравнение каждой группы лечения с CON Muscle.Нулевая гипотеза была отклонена при p <0,05. Этот эксперимент был проведен, как сообщалось дважды, с аналогичными результатами, и представлены результаты первого анализа. В анализах PPAR-чувствительных репортеров средние интенсивности GFP в каждой лунке были нормализованы для учета различий в исходной экспрессии GFP между лунками. Нормализованные интенсивности GFP через 24 часа сравнивали с нормализованными исходными измерениями с использованием двустороннего теста t для парных выборок по группам лечения с поправкой Холма-Бонферрони для множественных сравнений.Нулевая гипотеза была отклонена при p <0,05. Этот эксперимент был проведен, как сообщалось дважды, с аналогичными результатами, при этом были представлены результаты первого анализа. Этот анализ включает n = 5 для клеток, обработанных NF639, из-за технической проблемы во время захвата базового изображения, которая привела к потере одного изображения.
Для анализа хи-квадрат фактическое количество уникальных и общих ДЭГ и дисрегулируемых путей первоначально подсчитывалось для каждого подтипа. Например,
HER2-unique = гены, дифференциально экспрессируемые только у пациентов с HER2
\ ({\ mathrm {HER2}} – 2 – {\ mathrm {Group}} = {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {ERPR}} \ quad \ quad + \, {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {TP}} \ quad \ quad + \, {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {TN}}; \)
$$ {\ mathrm {HER2}} – 3 – {\ mathrm {Group}} = {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {ERPR}} \, \ cap \, {\ mathrm {TP}} \, + \, {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {ERPR}} \, \ cap \, {\ mathrm {TN}} \, + \, {\ mathrm {HER2}} \, \ cap \, {\ mathrm {TN}} \, \ cap \, {\ mathrm {TP}}.$
Затем, ожидаемое количество DEG и дисрегулируемых путей было вычислено при нулевой гипотезе о том, что DEG и дисрегулируемые пути не зависят от подтипа BC. Статистику хи-квадрат рассчитывали с использованием разницы между наблюдаемым и ожидаемым количеством ДЭГ и дисрегулируемых путей. Для 6 степеней свободы критическое значение хи-квадрат составляет 12,592 для статистической значимости при α = 0,05. Гистограммы представляют собой логарифмическое изменение количества ДЭГ или дисрегулируемых путей по сравнению с ожидаемыми значениями по категориям, а также предоставлены фактические статистические данные хи-квадрат для каждой категории.
Для графиков типа «ящик и усы» ширина прямоугольника представляет собой межквартильный диапазон (IQR), а усы простираются до единственного экстремального измерения в обоих направлениях, если только крайнее измерение не считается выбросом, и в этом случае экстремальное значение равно представлен в виде точки без связанных усов. Медианные значения представлены горизонтальной линией через каждую коробчатую диаграмму. Выбросы в этом контексте определяются как значения более экстремальные, чем 1,5 × IQR.
Сводка отчетов
Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.
Ральфи может похудеть Форд 2013
Ральфи Мэй в прошлом много шутил по поводу своего веса. но в недавнем прошлом он умалчивает об этом. Ему удалось сбросить более 400 фунтов с тех пор, как он был близок к смерти. С. . .
В субботу ожидались похороны комического Ральфи Мэй. бывший 800-фунтовый мужчина, которому перед смертью в 45 лет сумел сбросить более половины своего веса.
В 2015 году режиссер Кэт Райнхарт решил снять документальный фильм о похудании о любимом комике Ральфи Мэй.Как она год снимала Ральфи. его жена и двое маленьких детей. Стало ясно, что этот грандиозный комик не собирался худеть. Жена Ральфи. коллега-комик Лана Тернер. постепенно начала понимать, что ее муж не собирается меняться. и никакое количество. . .
Ральфи Мэй раньше весил более 800 фунтов. Он перенес операцию обходного желудочного анастомоза и похудел примерно на 350 фунтов, но много лет боролся со своим весом.
Ральфи Мэй Хайт. Масса. Возраст. Статистика тела здесь.Его рост был 1,75 м, а вес – 204 кг. См. Его историю свиданий (имена всех подруг). образовательный профиль. личные фавориты. интересные факты из жизни. и полная биография.
Его вес увеличился до 800 фунтов (360 кг). после автомобильной аварии в возрасте 16 лет. Он участвовал в клубе Vh2 Celebrity Fit Club и перенес операцию желудочного анастомоза в 2004 году, в результате чего его вес снизился на 350 фунтов (160 кг). После приступа вирусной пневмонии в круизе в октябре 2011г. Мэй похудела на 40 фунтов.
Ральфи Мэй разговаривает с Хайди и Фрэнком.Джон Пинет делится секретами потери веса и подготовки к судному дню | Шоу Хайди и Фрэнка – Продолжительность: 15:41. 955KLOS 231. 234 просмотра
Опубликовано 15 апреля 2013 г. Комик Ральфи Мэй рисует в нашей книге по пенису. Категория Комедия; Показать больше Показать меньше. Комментарии отключены. Автовоспроизведение. Если автовоспроизведение включено. предложенное видео будет. . .
Ральфи выпустил свой первый комедийный альбом Just Correct в 2004 году, за которым последовали четыре специальных выпуска Comedy Central под названием Girth of a Nation (2006). Prime Cut (2007).Austintatious (2008) и Too Big to Ignore (2012). а также два специальных выпуска Netflix: Imperfectly Yours (2013) и Unruly (2015). РАЛЬФИ МЭЙ. H O M E. B I O. P H O T O S. S H O P. C O N T A C T. Магазин. Более. 0. Войти ЛЮБЛЮ ТЕБЯ. РАЛЬФИ. . .
Что вам НЕОБХОДИМО знать о двигателях Ford EcoBoost. Автор Дастин Голли из DG’s ProTech. . . повреждение или потеря, которые могут возникнуть в результате неправильного использования…
Комик Габриэль Иглесиас. чей фильм “Пушистый фильм” выходит в пятницу. Иглесиас показывает Конану О’Брайену, как он потерял 110 фунтов! Этот клип изначально транслировался на Конан О ‘Брайен.по будням в…
Ральфи выпустил свой первый комедийный альбом Just Correct в 2004 году, за которым последовали четыре специальных выпуска Comedy Central под названием Girth of a Nation (2006). Prime Cut (2007). Austintatious (2008) и Too Big to Ignore (2012). а также два специальных выпуска Netflix: Imperfectly Yours (2013) и Unruly (2015).
Сколько весит Ford F350? Справочник по снаряженной массе + брутто. Автор Джош Хендерсон. в Форде. Делиться. Твитнуть. Штырь. 0 Акции. Зачем вам знать, сколько весит Ford F350? Это не такая уж необычная просьба, как может показаться, потому что это критически важно знать.особенно если вы собираетесь перевозить тяжелые грузы и хотите оставаться в безопасности и соблюдать закон во время вождения. Я. . .
Последний раз комик Ральфи Мэй разговаривал с Observer. еще в 2009 году. он был молодым отцом двоих детей с разницей в два года. Он был полон энергии. болтать и бросать изюминки для близких. . .
Режиссер Кэт Райнхарт. С Эваном Лундом. Тедди Маргас. Ральфи Мэй. Майкл Рамос. Вы должны захотеть этого для себя.
Жена Ральфи Мэй. кто исполнитель завещания.также получит остальное. остаток и остаток его имущества. сумма не определена
Де Ральф Дюрен “Ральфи” Май. от 17 февраля 1972 года из Чаттануги в федеральном округе Теннесси до 6. Октябрь 2017 года из Лас-Вегаса в федеральном округе штата Невада. war en US-amerikanesche Stand-up-Komiker a Filmschauspiller. Это лучше всего подходит для Kaméidisproduktioune fir den Tëleessender Comedy Central. Эм Спавек. Offiziell Websäit (en) Referenzen. . .
Комик Ральфи Мэй умер 6 октября в возрасте 45 лет.У него осталась жена. товарищ по комиксу Лана Тернер. и их двое детей. Апрель июнь май и август Джеймс Мэй. Они были женаты 10 лет.
Официальная домашняя страница Ford – Entdecken Sie die neuesten Angebote für Ford PKWs & Nutzfahrzeug. Neuwagen. Gebrauchtwagen. Probefahrten. Конфигуратор.
Забавный человек Ральфи Мэй умер в возрасте 45 лет. «Мы с разбитым горем сообщаем о безвременной кончине нашего друга. Ральфи Мэй. – подтвердил его представитель на шестой странице в пятницу.
Ральфи Мэй: жена.Знакомства. Семья и друзья В 2005 году Ральфи Мэй женился на Лане Тернер, которая также является комиком. После 10 лет совместной жизни. пара подала на развод и совместную опеку над своими детьми. Тем не мение. развод так и не был завершен из-за смерти Ральфи в 2017 году.
Ральфи Мэй Чистая стоимость Ральфи Мэй заработал деньги на нише комедиантов. За все время. В данный момент. 2020 год. Ральфи Мэй заработал 2 доллара. 5 миллионов. Точная сумма – 2580000 долларов США. Youtube Краткая биография. высота. масса. Даты: Дата рождения: 17 февраля.1972 г. Место рождения: Чаттануга. Теннесси. США Рост: 1,75 м (5 футов 8 дюймов) Профессия: сценарист. Актер. Продюсер фильма. …
Причина смерти Ральфи Мэй установлена. . Представитель коронера округа Кларк подтвердил E! Известие о том, что комик скончался от гипертонической болезни сердца. Файл. . .
Причина смерти Ральфи Мэй раскрыта 7 декабря. 2017 / 11:53 AM / CBS / AP Коронер округа Кларк в Неваде объявил причину смерти комика Ральфи Мэй.
Ральфи Мэй. Потеря веса до и после: 1993 Ральфи Мэй ~ Оттачивание своих навыков Kpop до и после похудания: Red Velvet – Венди Экстремальная потеря веса 2013-2017 гг.
Jetzt Ford Ranger 2013 для мобильных устройств. де Кауфен. Finden Sie viele günstige Auto Angebote bei mobile. de – Deutschlands größtem Fahrzeugmarkt
Ford Mustang 2013 Информация для Reifen. Stahl- und Alufelgen. Ausstattung aussuchen für Ford Mustang 2013: Achtung! Ausgewählte Einträge anzuzeigen Werksgrößen-Räder.die anderen sind Ersatzoptionen V Restyling [2010. . 2014]: 3. 7Ti 305 л.с. 5. 0Ti GT 420 л.с. Форд Мустанг 2013 3. 7Ти. . .
Ральфи – мужское имя. часто уменьшительная форма Ральфа. Это может относиться к: Ральфи Мэй (1972-2017). Американский стендап-комик и актер; Ральф «Ральфи» Чифаретто. персонаж сериала «Клан Сопрано»; Ральфи Теннелли. персонаж сериалов «Волшебный школьный автобус» и «Волшебный школьный автобус снова едет»; Ральфи Бизон. талисман Университета Колорадо Буффало
Ральфи Мэй скончался в пятницу.6 октября. После остановки сердца. Us Weekly подтверждает. Ему было 45. Смерть знаменитостей в 2017 году: звезды, которые мы потеряли Ральфи Мэй принимает 26-ю ежегодную премию Pollstar Awards. . .
Проект, начатый Ральфи и его семьей перед его смертью. Изначально задумывался как документальный фильм о похудании. вместо этого запечатлен грубый и интимный портрет семьи, имеющей дело с зависимостью. жена Лана Тернер смиряется со своей неспособностью изменить человека, которого она любит. и трагически ошибочный комик, потерпевший крушение в один из последних лет своей жизни.
мая (2009 г.) Привет, Ральф Дурен «Ральфи» Мэй (Pebrero 17. 1972 – Oktubre 6. 2017) в США, актер Америки. Usa ka turók ini nga barasahon. Dako it imo maibubulig ha Wikipedia pinaagi han pagparabong hini. На Wikimedia Commons есть много известных СМИ: Ральфи Мэй. . .
Состояние и зарплата Ральфи Мэй: Ральфи Мэй – американский стендап-комик, состояние которого составляет 2 миллиона долларов. Ральфи Мэй приобрел чистую стоимость
Ральфи Мэй: Слишком велик, чтобы игнорировать (2012.tv-dokumentumfilm) Ralphie May: Imperfectly Yours (2013. tv-dokumentumfilm) Ralphie May: Filthy Animal Tour (2014. tv) Ralphie May: Unruly (2015. videó) Jegyzetek. a b Utoljára szerkesztve 2018. 15 сентября. 16: 52-кор. A lap szövege. . .
Ральфи Мэй – один из главных актеров американских комедий кино. . .
Найти текущий автомобиль Ford Mustang Gebrauchtwagen-Angebote с 2013 года на AutoScout24. dem europaweit größten Online-Automarkt.
Ralphie May Filthy Animal Tour (телевизионный выпуск, 2014 г.) (сценарист) Ralphie May: Imperfectly Yours (специальный документальный фильм, 2013 г.) Ralphie May: Too Big to Ignore (специальный документальный фильм 2012 г.) Видеодневник из Ирака (документальный фильм 2009 г.) (рассказ) Ральфи Мэй: Остин-Татиус (специальный документальный фильм, 2008 г.) Ralphie May: Prime Cut (Специальный документальный фильм, 2007 г.) Ральфи Мэй: Обод нации (специальный телевизионный фильм…
Der Ford Mustang был создан для моделирования 2013 ein umfangreiches Facelift verpasst.Neben einem noch агрессивен Erscheinungsbild legte der US-Autobauer auch unter der Haube Hand an.
Ford® создан для Америки. Откройте для себя последнюю линейку новых автомобилей Ford! Изучите варианты гибридных и электромобилей. посмотреть фото. сборка и цена. поиск в инвентаре. узнавайте о ценах и льготах, а также о последних технологиях и новостях Ford.
2013 Ford Super Duty F-350 DRW Технические характеристики и характеристики Supercab Lariat 4WD Технические характеристики и цены. ИЗМЕНИТЬ АВТОМОБИЛЬ СРАВНИТЬ Значения Фотографии Характеристики Обзоры и рейтинги Безопасность.Ценности Фотографии Характеристики Обзоры и рейтинги Безопасность. Обзор. Комбинированный МПГе. 6. Двигатель 2л. 4WD. Трансмиссия. 5. Пассажиры. 3. 316 лошадиных сил Ft 3. 397 Torque Ft 3. См. Другие уровни отделки салона. Посмотреть…
Ральфи Мэй Чистая стоимость составляет. 2 доллара. 5 миллионов Ральфи Мэй Биография. зарплата и собственный капитал Ральфи Майта: Ральфи Майт был американским комиком, чье состояние составляло 2 миллиона долларов. Ральфи Майт приобрел репутацию любимого комика, выступавшего во многих телешоу и специальных программах, а также гастролировавшего по Соединенным Штатам и по всему миру.А всегда был добрым…
Ralphie May Tour 2020. Ralphie May объявляет о планах на билеты и долгожданное расписание выступлений на этот год. Отправляйтесь в путь в поддержку последнего альбома. первые концерты в турне начнутся всего через несколько недель на местном уровне. Текущие даты будут проходить через…
Hier wird ein Ford Focus в провинции Браун. Das Auto ist derzeit noch angemeldet und wird auch noch. . . 79. 000 км 2012. 10. 000 € 96215 Lichtenfels. Вестерн. 22:16. Ford Focus Turnier 2.0 EcoBoost ST mit Leder-Excl. . . Sehr gepflegter Focus ST abzugeben. Fahrzeug wird verkauft aufgrund Anschaffung des neuen ST :-). . . . 31 000 км 2016. 23 490 € 57629 Müschenbach. Вестерн. 21:32. Форд Фокус 2.5. . .
После изнуряющего ворона 2013 года потерял свои усилия. – пробормотал Форд, почему он не мертв. Я внезапно подумал, что Сора был рядом со мной. и она все это видела. Я был удивлен, что Сора похудела. . .
Для достижения и поддержания потери веса. нужно изменить образ жизни и не смотреть на краткосрочные цели – сбросить 5–10 кг и затем вернуться к старым привычкам.С похуданием. правильное отношение важно. В этом посте. мы говорим о 10 отношениях к похуданию, которые вы должны изменить, чтобы увидеть положительные результаты.
Кэрол Энн Лиллиан Форд (урожденная Хиггинс; родилась 16 июня 1940 года в Илфорде … Форд в основном прекратил действовать из-за болезни в 1977 году, которая привела к резкому снижению веса и потере голоса (позже он восстановился). с тех пор она обучала политиков, бизнесменов и выступающих после ужина.и актеры. С 2000-х гг. тем не мение. она . . .
По новой программе Ford Promise. клиенты, которые арендуют или приобретают автомобиль с финансированием Ford Credit, а затем теряют работу в течение года, могут вернуть автомобиль. Ford Credit оценит автомобиль, используя среднюю стоимость обмена, установленную Национальной ассоциацией автомобильных дилеров (NADA). уменьшите непогашенный остаток клиента на эту сумму и откажитесь от дополнительных 15 долларов. 000. Заказчик есть. . .
Это лучший напиток, если вы хотите похудеть и также хотите пить чай, поскольку это напиток с нулевой калорийностью, который подавляет аппетит, а также является эффективным дополнением к другим методам похудания.6. Белый чай: Белый чай делают из самых молодых чайных листьев и почек; этот чай останавливает образование новых жировых клеток и в то же время стимулирует сжигание жира. Этот чай тоже работает. . .
Пятница 2020-06-26 17:16:11: Вегетарианский план диеты Форда | Диета Форда Вегетарианская | | Veeramachaneni-Diet-Plan-Day-1
Даже когда Селби разместила свой блог. не все было хорошо. По оценкам Reuters, в Великобритании от 1500 до 5000 человек уже могли заразиться коронавирусом.Оценка основана на. . .
Последний выживший комикс
Instagram.com: https://instagram.com/
Linkedin.com: https://linkedin.com/
Youtube: https://youtube.com/
Twitter: https://twitter.com/
Определение относительного и комбинированного вклада CTCF и CTCFL в регуляцию генома | Genome Biology
Tang Z, Luo OJ, Li X, Zheng M, Zhu JJ, Szalaj P, Trzaskoma P, Magalska A, Wlodarczyk J, Ruszczycki B, et al.CTCF-опосредованная архитектура трехмерного генома человека раскрывает топологию хроматина для транскрипции. Клетка. 2015; 163: 1611–27.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Санборн А.Л., Рао С.С., Хуанг С.К., Дюран, штат Северная Каролина, Хантли М.Х., Джуэтт А.И., Бочков И.Д., Чиннаппан Д., Каткоски А., Ли Дж. И др. Экструзия хроматина объясняет ключевые особенности образования петель и доменов в геномах дикого типа и сконструированных геномах. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2015; 112: E6456–65.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Нюблер Дж., Фуденберг Г., Имакаев М., Абденнур Н., Мирный Л.А. Организация хроматина за счет взаимодействия экструзии петель и сегрегации компартментов. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2018; 115: E6697–706.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Нэсмит К. Распространение генома: соединение, разрешение и разделение сестринских хроматид во время митоза и мейоза.Анну Рев Жене. 2001; 35: 673–745.
CAS
PubMed
Google Scholar
Фуденберг Г, Имакаев М, Лу Ц., Голобородько А, Абденнур Н, Мирный ЛА. Формирование хромосомных доменов путем выдавливания петель. Cell Rep. 2016; 15: 2038–49.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Gomez-Marin C, Tena JJ, Acemel RD, Lopez-Mayorga M, Naranjo S., de la Calle-Mustienes E, Maeso I, Beccari L., Aneas I, Vielmas E, et al.Эволюционное сравнение показывает, что расходящиеся сайты CTCF являются сигнатурами предковых топологических границ ассоциирующих доменов. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2015; 112: 7542–7.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Нора Е.П., Голобородько А., Валтон А.Л., Гибкус Дж. Х., Уберсон А., Абденнур Н., Деккер Дж., Мирный Л.А., Бруно Б.Г. Направленная деградация CTCF отделяет локальную изоляцию хромосомных доменов от геномной компартментализации.Клетка. 2017; 169: 930–944. e922.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Лукинов Д.И., Пугачева Е., Ватолин С., Пак С.Д., Мун Х., Чернухин И., Маннан П., Ларссон Е., Кандури С., Востров А.А. BORIS, новый специфический для мужской зародышевой линии белок, связанный с событиями эпигенетического репрограммирования, имеет тот же домен из 11-цинковых пальцев, что и CTCF, инсуляторный белок, участвующий в считывании отпечатанных меток в соме. Proc Natl Acad Sci.2002; 99: 6806–11.
CAS
PubMed
Google Scholar
Хор Т.А., Дикин Дж. Э., Graves JAM. Эволюция эпигенетических регуляторов CTCF и BORIS / CTCFL у амниот. PLoS Genet. 2008; 4: e1000169.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Sleutels F, Soochit W, Bartkuhn M, Heath H, Dienstbach S, Bergmaier P, Franke V, Rosa-Garrido M, van de Nobelen S, Caesar L.Регулятор гена мужских зародышевых клеток CTCFL функционально отличается от CTCF и связывает CTCF-подобные консенсусные сайты в зависимости от состава нуклеосом. Эпигенетика хроматина. 2012; 5: 8.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Солтаниан С., Дехгани Х. БОРИС: ключевой регулятор стволовости рака. Cancer Cell Int. 2018; 18: 1–13.
Google Scholar
Suzuki T, Kosaka-Suzuki N, Pack S, Shin DM, Yoon J, Abdullaev Z, Pugacheva E, Morse HC, Loukinov D, Lobanenkov V. Экспрессия специфической для семенников формы Gal3st1 (CST), гена, необходимого для сперматогенез регулируется паралогическим геном CTCF BORIS. Mol Cell Biol. 2010. 30: 2473–84.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Бхан С., Неги С.С., Шао С., Глейзер К.А., Чуанг А., Гайкалова Д.А., Сан В., Сидрански Д., Ха ПК, Калифано Дж. А.Связывание BORIS с промоторами антигенов рака яичка, MAGEA2, MAGEA3 и MAGEA4, связано с их активацией транскрипции при раке легких. Clin Cancer Res. 2011; 17: 4267–76.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Hong JA, Kang Y, Abdullaev Z, Flanagan PT, Pack SD, Fischette MR, Adnani MT, Loukinov DI, Vatolin S, Risinger JI. Взаимное связывание CTCF и BORIS с промотором NY-ESO-1 совпадает с дерепрессией этого гена рака яичка в клетках рака легких.Cancer Res. 2005; 65: 7763–74.
CAS
PubMed
Google Scholar
Канг Й., Хонг Дж., Чен Дж., Нгуен Д., Шрамп Д. Динамические транскрипционные регуляторные комплексы, включая BORIS, CTCF и Sp1, модулируют экспрессию NY-ESO-1 в клетках рака легких. Онкоген. 2007; 26: 4394.
CAS
PubMed
Google Scholar
Д’Арси В., Абдуллаев З.К., Поре Н., Докье Ф., Торрано В., Чернухин И., Смарт М., Фаррар Д., Методиев М., Фернандес Н.Потенциал BORIS обнаружен в лейкоцитах больных раком груди как ранний маркер онкогенеза. Clin Cancer Res. 2006; 12: 5978–86.
CAS
PubMed
Google Scholar
Дарси В., Поре Н., Докье Ф., Абдуллаев З., Чернухин И., Кита Г., Рай С., Смарт М., Фаррар Д., Пак С. БОРИС, паралог фактора транскрипции, CTCF, является аберрантно выражен в опухолях молочной железы. Br J Рак. 2008; 98: 571.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Райзингер Дж. И., Чандрамули Г. В., Максвелл Г. Л., Кастер М, Пак S, Лукинов Д., Апреликова О., Литзи Т., Шрамп Д. С., Мерфи СК. Анализ глобальной экспрессии генов рака / семенников при раке матки показывает высокую частоту экспрессии BORIS. Clin Cancer Res. 2007; 13: 1713–9.
CAS
PubMed
Google Scholar
Okabayashi K, Fujita T, Miyazaki J, Okada T., Iwata T., Hirao N, Noji S, Tsukamoto N, Goshima N, Hasegawa H. Антиген рака яичек BORIS – это новый прогностический маркер для пациентов с пищеводом. рак.Cancer Sci. 2012; 103: 1617–24.
CAS
PubMed
Google Scholar
He J, Huang Y, Liu Z, Zhao R, Liu Q, Wei L, Yu X, Li B, Qin Y. Гипометилирование BORIS является многообещающим прогностическим биомаркером гепатоцеллюлярной карциномы. Ген. 2017; 629: 29–34.
CAS
PubMed
Google Scholar
Hillman JC, Пугачева EM, Barger CJ, Sribenja S, Rosario S, Albahrani M, Truskinovsky AM, Stablewski A, Liu S, Loukinov DI.Экспрессия BORIS в клетках-предшественниках рака яичников изменяет цистром CTCF и увеличивает инвазивность через GALNT14. Mol Cancer Res. 2019; 17: 2051–62.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Salgado-Albarrán M, González-Barrios R, Guerra-Calderas L, Alcaraz N, Sánchez-Correa TE, Castro-Hernández C, Sánchez-Pérez Y, Аречага-Окапа-де-Карран-Э, Гаркага-Окапа-де-Карран Леон, округ Колумбия. Эпигенетический фактор BORIS (CTCFL) контролирует регуляторную сеть андрогенных рецепторов при раке яичников.Онкогенез. 2019; 8: 1–12.
Google Scholar
Woloszynska-Read A, James SR, Link PA, Yu J, Odunsi K, Karpf AR. Зависимая от метилирования ДНК регуляция экспрессии BORIS / CTCFL при раке яичников. Архив по противораковому иммунитету. 2007; 7: 21.
Google Scholar
Woloszynska-Read A, Zhang W, Yu J, Link PA, Mhawech-Fauceglia P, Collamat G, Akers SN, Ostler KR, Godley LA, Odunsi K.Скоординированный промотор антигена зародышевой линии рака и глобальное гипометилирование ДНК при раке яичников: связь с соотношением экспрессии BORIS / CTCF и поздней стадией. Clin Cancer Res. 2011; 17: 2170–80.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Cheema Z, Hari-Gupta Y, Kita GX, Farrar D, Seddon I, Corr J, Klenova E. Экспрессия антигена рака яичка BORIS коррелирует с раком простаты. Предстательная железа. 2014; 74: 164–76.
CAS
PubMed
Google Scholar
Hoffmann MJ, Müller M, Engers R, Schulz WA. Эпигенетический контроль экспрессии CTCFL / BORIS и OCT4 при злокачественных новообразованиях мочеполовой системы. Biochem Pharmacol. 2006; 72: 1577–88.
CAS
PubMed
Google Scholar
Дебрюйн Д.Н., Дрис Р., Сенгупта С., Серуджия Д., Гао И., Шарма Б., Хуанг Х., Моро Л., Маклейн М., Дэй Д.С. BORIS способствует регуляторным взаимодействиям хроматина в устойчивых к лечению раковых клетках.Природа. 2019; 572: 676–80.
CAS
PubMed
Google Scholar
Кленова Е.М., Морзе ХК III, Ольссон Р., Лобаненков В.В. Новое семейство генов BORIS + CTCF однозначно участвует в эпигенетике нормальной биологии и рака. В: Семинары по биологии рака: Elsevier; 2002. с. 399–414.
Пугачева Е.М., Сузуки Т, Пак С.Д., Косака-Сузуки Н, Юн Дж., Востров А.А., Барсов Э., Струнников А.В., Морс ХК III, Лукинов Д.Структурная сложность человеческого гена BORIS в гаметогенезе и раке. PLoS One. 2010; 5: e13872.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Cheever MA, Allison JP, Ferris AS, Finn OJ, Hastings BM, Hecht TT, Mellman I, Prindiville SA, Viner JL, Weiner LM. Приоритезация раковых антигенов: пилотный проект национального института рака по ускорению трансляционных исследований. Clin Cancer Res. 2009; 15: 5323–37.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Hashimoto H, Wang D, Horton JR, Zhang X, Corces VG, Cheng X. Структурная основа универсального и зависимого от метилирования связывания CTCF с ДНК. Mol Cell. 2017; 66: 711–20.
Инь М., Ван Дж., Ван М., Ли Х, Чжан М., Ву Q, Ван Ю. Молекулярный механизм направленного распознавания CTCF разнообразных геномных сайтов. Cell Res. 2017; 27: 1365.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Nakahashi H, Kwon K-RK, Resch W., Vian L, Dose M, Stavreva D, Hakim O, Pruett N, Nelson S, Yamane A. Полногеномная карта многовалентности CTCF переопределяет код CTCF. Cell Rep., 2013; 3: 1678–89.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Маршалл А.Д., Бейли К.Г., Раско Дж. Э.. CTCF и BORIS в регуляции генома и раке. Curr Opin Genet Dev. 2014; 24: 8–15.
CAS
PubMed
Google Scholar
Пугачева Е.М., Риверо-Инохоса С., Эспиноза, Калифорния, Мендес-Катала С.Ф., Кан С., Сузуки Т., Косака-Сузуки Н., Робинсон С., Нагараджан В., Йе З. Сравнительный анализ занятости CTCF и BORIS выявил два различных класса CTCF связывание геномных областей. Genome Biol. 2015; 16: 161.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Saldaña-Meyer R, González-Buendía E, Guerrero G, Narendra V, Bonasio R, Recillas-Targa F, Reinberg D.CTCF регулирует ген p53 человека посредством прямого взаимодействия с его естественным антисмысловым транскриптом Wrap53. Genes Dev. 2014; 28: 723–34.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Xiao T, Wallace J, Felsenfeld G. Специфические сайты на С-конце CTCF взаимодействуют с субъединицей SA2 когезинового комплекса и необходимы для когезин-зависимой изоляционной активности. Mol Cell Biol. 2011; 31: 2174–83.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Saldaña-Meyer R, Rodriguez-Hernaez J, Escobar T, Nishana M, Jácome-López K, Nora EP, Bruneau BG, Tsirigos A, Furlan-Magaril M, Skok J. Взаимодействия РНК важны для CTCF-опосредованной организации генома. Mol Cell. 2019 ;.
Кленова Е.М., Николас Р.Х., Салли У., Карне А.Ф., Ли Р.Е., Лобаненков В.В., Гудвин Г.Х. Нарушения молекулярной массы фактора транскрипции CTCF: CTCF аберрантно мигрирует в SDS-PAGE, и на размер экспрессируемого белка влияют UTR и последовательности в кодирующей области гена CTCF.Nucleic Acids Res. 1997; 25: 466–73.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Cerami E, Gao J, Dogrusoz U, Gross BE, Sumer SO, Aksoy BA, Jacobsen A, Byrne CJ, Heuer ML, Larsson E. Портал геномики рака cBio: открытая платформа для изучения многомерной геномики рака данные: AACR; 2012.
Sati L, Zeiss C, Yekkala K, Demir R, McGrath J. Экспрессия гена CTCFL во время эмбриогенеза мыши вызывает задержку роста, постнатальную летальность и нарушение регуляции пути трансформирующего фактора роста β.Mol Cell Biol. 2015; 35: 3436–45.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Parelho V, Hadjur S, Spivakov M, Leleu M, Sauer S, Gregson HC, Jarmuz A, Canzonetta C, Webster Z, Nesterova T. Cohesins функционально связываются с CTCF на плечах хромосом млекопитающих. Клетка. 2008. 132: 422–33.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Rubio ED, Reiss DJ, Welcsh PL, Disteche CM, Filippova GN, Baliga NS, Aebersold R, Ranish JA, Krumm A. CTCF физически связывает когезин с хроматином. Proc Natl Acad Sci. 2008; 105: 8309–14.
CAS
PubMed
Google Scholar
Вендт К.С., Петерс Дж.М. Как когезин и CTCF взаимодействуют в регуляции экспрессии генов. Chromosom Res. 2009; 17: 201–14.
CAS
Google Scholar
Hansen AS, Amitai A, Cattoglio C, Tijan R, Darzacq X. Управляемая ядерная разведка повышает эффективность поиска целей CTCF. Nat Chem Biol. 2020; 16: 257–66.
Hansen AS, Hsieh T-HS, Cattoglio C, Pustova I, Saldaña-Meyer R, Reinberg D, Darzacq X, Tjian R. Четкие классы петель хроматина, выявленные делецией РНК-связывающей области в CTCF . Mol Cell. 2019; 76: 395–411.e13.
Кумар С., Шривастав Р.К., Уилкс Д.В., Росс Т., Ким С., Ковальски Дж., Чатла С., Чжан К., Наяк А., Гуха М.Эстроген-зависимая DLL1-опосредованная передача сигналов notch способствует развитию рака молочной железы в просвете. Онкоген. 2019; 38: 2092.
CAS
PubMed
Google Scholar
Сейлс-Диас Дж., Сильва Дж., Лами М., Феррейра А., Барбас А. Лиганд с надрезом DLL1 проявляет канцерогенные свойства в клетках рака груди человека. PLoS One. 2019; 14: e0217002.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Василаки Э., Канаки З., Стравоподис Д. Д., Клинакис А. Dll1 Помечает клетки происхождения Ras-индуцированного рака в плоском эпителии мышей. Перевод Онкол. 2018; 11: 1213–9.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Bettinsoli P, Ferrari-Toninelli G, Bonini S, Prandelli C, Memo M. Notch лиганд Delta-like 1 как новая молекулярная мишень в детской нейробластоме. BMC Рак. 2017; 17: 352.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Xu H, Shan J, Jurukovski V, Yuan L, Li J, Tian K. TSP50 кодирует специфичную для семенников протеазу и негативно регулируется p53. Cancer Res. 2007. 67: 1239–45.
CAS
PubMed
Google Scholar
Рамачандран А., Визан П., Дас Д., Чакраварти П., Фогт Дж., Роджерс К.В., Мюллер П., Хинк А.П., Сапкота Г.П., Хилл С.С. TGF-β использует новый способ активации рецептора для фосфорилирования SMAD1 / 5 и индукции перехода эпителия в мезенхиму.Элиф. 2018; 7: e31756.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Мемон А., Ли В.К. KLF10 как ген-супрессор опухоли и его передача сигналов TGF-β. Раки. 2018; 10: 161.
PubMed Central
Google Scholar
Лю Б., Сун Х, Суёка Дж., Гарсия Дж. Г., Лейдерман Ю. И.. Передача сигналов TGFβ индуцирует экспрессию Gadd45b в ганглиозных клетках сетчатки. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci.2013; 54: 1061–9.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Zhang Y, Liu Z. STAT1 в раке: друг или враг? Discov Med. 2017; 24: 19–29.
PubMed
Google Scholar
Плисов С., Цанг М., Ши Дж., Бойл С., Йошино К., Данвуди С.Л., Давид И.Б., Шиода Т., Перантони А.О., де Цестекер М.П. Cited1 – это бифункциональный транскрипционный кофактор, который регулирует формирование паттерна в раннем нефроне.J Am Soc Nephrol. 2005; 16: 1632–44.
CAS
PubMed
Google Scholar
Wutz G, Várnai C, Nagasaka K, Cisneros DA, Stocsits RR, Tang W., Schoenfelder S, Jessberger G, Muhar M, Hossain MJ. Топологически связанные домены и петли хроматина зависят от когезина и регулируются белками CTCF, WAPL и PDS5. EMBO J. 2017; 36: 3573–99.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Гарг Р., Бенедетти Л.Г., Абера МБ, Ван Х., Абба М., Казаньец М.Г. Протеинкиназа С и рак: что мы знаем и чего не знаем. Онкоген. 2014; 33: 5225.
CAS
PubMed
Google Scholar
Bergmaier P, Weth O, Dienstbach S, Boettger T, Galjart N, Mernberger M, Bartkuhn M, Renkawitz R. Выбор сайтов связывания для CTCFL по сравнению с CTCF определяется хроматином и предпочтением последовательности. Nucleic Acids Res. 2018; 46: 7097–107.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Gong Y, Lazaris C, Sakellaropoulos T, Lozano A, Kambadur P, Ntziachristos P, Aifantis I, Tsirigos A. Стратификация границ TAD показывает предпочтительную изоляцию суперэнхансеров сильными границами. Nat Commun. 2018; 9: 1–12.
Google Scholar
Хаархус Дж. Х., ван дер Вейде Р. Х., Бломен В. А., Яньес-Куна Дж. О., Амендола М., ван Руйтен М. С., Криджгер П. Х., Теуниссен Х., Медема Р. Х., ван Стинсель Б.Фактор высвобождения когезина WAPL ограничивает удлинение петли хроматина. Клетка. 2017; 169: 693–707. e614.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Rao SS, Huang S-C, St Hilaire BG, Engreitz JM, Perez EM, Kieffer-Kwon K-R, Sanborn AL, Johnstone SE, Bascom GD, Bochkov ID. Потеря Cohesin устраняет все петлевые домены. Клетка. 2017; 171: 305–320. e324.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Пугачева Е.М., Кубо Н, Лукинов Д., Таймул М, Канг С., Ковальчук А.Л., Струнников А.В., Центнер Г.Е., Рен Б., Лобаненков В.В. CTCF опосредует образование петель хроматина за счет удерживания когезина, зависимого от N-концевого домена. Proc Natl Acad Sci. 2020; 117: 2020–31.
Zoabi M, Nadar-Ponniah PT, Khoury-Haddad H, Usaj M, Budowski-Tal I, Haran T., Henn A, Mandel-Gutfreund Y, Ayoub N. РНК-зависимая локализация лизиндеметилазы KDM4D в хроматине способствует деметилированию h4K9me3. Nucleic Acids Res.2014; 42: 13026–38.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Шмидл С., Рендейро А.Ф., Шеффилд, Северная Каролина, Бок С. Чипментация: быстрая, надежная, малоинтенсивная ChIP-seq для гистонов и факторов транскрипции. Нат методы. 2015; 12: 963.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Langmead B, Salzberg SL. Быстрое выравнивание с пропуском считывания с помощью галстука-бабочки 2.Нат методы. 2012; 9: 357–9.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Zhang Y, Liu T, Meyer CA, Eeckhoute J, Johnson DS, Bernstein BE, Nusbaum C, Myers RM, Brown M, Li W. Анализ ChIP-Seq (MACS) на основе моделей. Genome Biol. 2008; 9: R137.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Рамирес Ф., Райан Д.П., Грунинг Б., Бхардвадж В., Килперт Ф., Рихтер А.С., Хейн С., Дандар Ф., Манке Т.deepTools2: веб-сервер нового поколения для глубокого анализа данных. Nucleic Acids Res. 2016; 44: W160–5.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Старк Р., Браун Г. DiffBind: анализ дифференциального связывания данных пиков ChIP-Seq. Версия пакета R. 2011; 100: 4–3.
Google Scholar
Добин А., Дэвис К.А., Шлезингер Ф., Дренков Дж., Залески С., Джа С., Батут П., Шейссон М., Джингерас Т.Р.STAR: сверхбыстрый универсальный выравниватель RNA-seq. Биоинформатика. 2013; 29: 15–21.
CAS
Google Scholar
Лав М.И., Хубер В., Андерс С. Умеренная оценка кратного изменения и дисперсии данных РНК-seq с помощью DESeq2. Genome Biol. 2014; 15: 550.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Ларссон Дж .: Эйлерр: пропорциональные площади диаграммы Эйлера. R Версия пакета 4.1. 0. 2018.
Google Scholar
Ruffier M, Kähäri A, Komorowska M, Keenan S, Laird M, Longden I, Proctor G, Searle S, Staines D, Taylor K. Ресурсы основного программного обеспечения Ensembl: хранение и программный доступ к последовательности ДНК и геному аннотация. База данных. 2017; 2017: bax020.
Lazaris C, Kelly S, Ntziachristos P, Aifantis I, Tsirigos A. HiC-bench: комплексный и воспроизводимый анализ данных Hi-C, разработанный для исследования параметров и сравнительного анализа.BMC Genomics. 2017; 18:22.
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Циригос А., Хайминен Н., Билал Е., Утро Ф. GenomicTools: вычислительная платформа для разработки высокопроизводительной аналитики в геномике. Биоинформатика. 2011; 28: 282–3.
PubMed
Google Scholar
Yu G, Wang L-G, He Q-Y. ChIPseeker: пакет R / Bioconductor для аннотации, сравнения и визуализации пиков ChIP.Биоинформатика. 2015; 31: 2382–3.
CAS
PubMed
Google Scholar
Бейли Т.Л., Боден М., Буске Ф.А., Фрит М., Грант С.Е., Клементи Л., Рен Дж., Ли В.В., Нобл В.С. MEME SUITE: инструменты для поиска и поиска мотивов. Nucleic Acids Res. 2009; 37: W202–8.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Machanick P, Bailey TL. MEME-ChIP: анализ мотивов больших наборов данных ДНК.Биоинформатика. 2011; 27: 1696–7.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Heinz S, Benner C, Spann N, Bertolino E, Lin YC, Laslo P, Cheng JX, Murre C, Singh H, Glass CK. Простые комбинации факторов транскрипции, определяющих клонирование, активируют цис-регуляторные элементы, необходимые для идентичности макрофагов и В-клеток. Mol Cell. 2010; 38: 576–89.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Имакаев М., Фуденберг Г., МакКорд Р.П., Наумова Н., Голобородько А., Ладжуа Б.Р., Деккер Дж., Мирный Л.А. Итеративная коррекция данных Hi-C выявляет признаки организации хромосом. Нат методы. 2012; 9: 999.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Крейн Е., Биан К., МакКорд Р.П., Ладжой Б.Р., Уиллер Б.С., Ралстон Е.Дж., Узава С., Деккер Дж., Мейер Б.Дж. Ремоделирование топологии Х-хромосомы под действием конденсина во время дозовой компенсации.Природа. 2015; 523: 240.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Дюран NC, Робинсон Дж. Т., Шамим М.С., Махол И., Месиров Дж. П., Лендер Е.С., Эйден Э.Л. Juicebox предоставляет систему визуализации для карт контактов Hi-C с неограниченным увеличением. Клеточные системы. 2016; 3: 99–101.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Дюран, Северная Каролина, Шамим М.С., Махол I, Рао СС, Хантли М.Х., Лендер Е.С., Эйден Э.Л.Соковыжималка обеспечивает систему одним щелчком для анализа экспериментов Hi-C с петлевым разрешением. Клеточные системы. 2016; 3: 95–8.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
Skok J, Nishana M, Rodriguez-Hernaez J. Цинковые пальцы и N / C-концевые домены CTCF и CTCFL вносят вклад в сайт-специфическое функциональное воздействие связывания. GSE140363, Омнибус экспрессии генов. 2019; Доступно по адресу: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi? acc = GSE140363.
Алла Пугачева впервые ответила на высказывания Сергея Соседова в свой адрес
.
Музыкальный критик Сергей Соседов известен своими резкими высказываниями в адрес звезд отечественного шоу-бизнеса. Так, совсем недавно он раскритиковал пение Аллы Пугачевой. Более того, «Соседи» назвали выступления Дивы жалким зрелищем.
Стоит отметить, что Алла Борисовна сначала никак не комментировала высказывания Сергея в свой адрес.И только в новом выпуске программы «Ты не поверишь!» Пугачева отреагировала на слова музыкального критика. «Не трогай Сережу! Ему нужно как-то зарабатывать », – сказала Алла Борисовна. Певица добавила, что раньше Соседи, наоборот, хвалили ее. «Он зарабатывал деньги, хваля меня. Теперь она зарабатывает на том, что (далее непристойно. – прим. Стр. ) », – заключила Алла Борисовна.
Алла Пугачева считает, что Сергей Соседов просто заслуживает своей критикой звезд шоу-бизнеса
Надо сказать, что Соседов в последнее время тоже резко высказался о Баскове.На этот раз музыкальному критику не понравился дуэт Николая с блогером Данени Милохиным на песню «Дико Тусим». По словам Сергея, Басков в ролике на этот трек был похож на «вставной зуб». Николай, однако, не согласен с критиком. По словам исполнителя, публика хорошо приняла его дуэт с Милохиным, а это для него как артиста самое главное.
«Ну, он, великий гений, знает лучше. Это его личное мнение, поэтому пускай куда хочет и как хочет.… Если через это люди узнают о нем, это, наверное, заслуживает удивления », – сказал Басков о критике Соседова в его адрес.
https://www.youtube.com/watch?v=JTjTyU_DC4k/
Клип Николая Баскова и Дани Милохина
Напомним, ранее Сергей Соседов осуждал молодую 71-летнюю Аллу Пугачеву. Дело в том, что в прошлом году Алла Борисовна дала масштабный концерт в честь своего 70-летия. Не все поклонники звезды смогли увидеть долгожданное шоу вживую, так как билеты на него были дорогими.Так что обсуждение самого концерта продолжается даже спустя много месяцев. Соседи не только прошлись по музыкальным данным Примадонны, но и рассказали о ее желании выглядеть моложе.
Примечательно, что Алла Пугачева действительно заметно изменилась за последние годы. Она не только сильно похудела, но и отказалась от привычных халатов, в которых долгое время выходила на улицу. Вместо этого Алла Борисовна теперь примеряет короткие шортики и мини-платья. Так, в минувшую пятницу Пугачева появилась на праздновании 30-летия Анастасии Ивлеевой в полупрозрачной юбке.
Алла Пугачева и Максим Галкин на праздновании дня рождения Анастасии Ивлеевой
Интересно, что Примадонна не скрывает, что своим нынешним внешним видом обязана пластическим хирургам. Что касается Соседова, то он считает поведение Аллы Борисовны комичным. «Они действительно думают, что они все еще ох-хо, что в 70 они еще могут. А если сделали пластическую операцию, а она ходит, как девочка на тонких ножках, и кудельчки, она вообще думает, что ей 18 », – сказал музыкальный критик в интервью программе« Однажды »на НТВ.
Читайте также:
71-летняя Алла Пугачева появилась на дне рождения Анастасии Ивлеевой в прозрачной юбке
Алла Пугачева впервые за долгое время появилась на телевидении в шоу «Сегодня вечером»
Алла Пугачева назвала Валентина Юдашкина и его жену своими настоящими друзьями и подарком судьбы
это правда или предположение? И тем не менее Максим Галкин все меньше и меньше времени проводит с сердечным другом.Вместе у людей они появляются только в особых случаях. На самом деле он живет в роженице
В июле 2001 года состоялось первое знакомство малоизвестного комика и известного певца. Оба они участвовали в «Славянском базаре», который проходил в Витебске. Максим был в роли участника, а Алла была председателем судейской комиссии. Их друг с другом познакомил сам Филипп Киркоров.
В августе того же года вторая судьбоносная встреча произошла на празднике в арт-концертном зале «Россия».В тот вечер Алла и Максим долго разговаривали, пародист даже решил пригласить даму на танец. Галкин признается, что всегда был поклонником творчества Пугачевой, восхищался этой женщиной. В 2001 году между влюбленными вспыхнул настоящий пожар, они поняли, что не могут жить друг без друга. Алла и Максим уверены, что созданы друг для друга и идеальны.
Алла сожалеет о разнице в возрасте с Максимом. Наверное, они бы познакомились раньше.
Пугачева всегда обращала внимание на интеллектуалов в очках, а Максим просто предпочитает эту для себя.Еще до встречи с Галкиным между Киркоровым и Пугачевой начались разлады. Они перестали понимать друг друга. Максим оказался в нужное время в нужный час рядом с Примадонной. Отношения с Кристиной Орбакайте сложились не сразу. Кристина обладает волевым и упорным характером. Трепетно и заботливо относится к маме, ей небезразлично, кто рядом с Аллой. Но вскоре все упущения прошли.
Алла и Максим наслаждаются семейной жизнью. Муж и жена всегда вместе ходят на мероприятия, вместе отдыхают.
Совместная жизнь
Первые три года совместной жизни не обошлись без ссор и скандалов. Это был период измельчения. Но со временем буря утихла, Алла и Максим научились понимать друг друга. Даже в тяжелые периоды, в моменты обиды, которые иногда длились несколько дней, пара не собиралась расставаться. Алла и Максим – взрослые состоятельные люди, они знают, чего хотят, ребячливость уже не в их уровне, и им нечем подогревать интерес публики с помощью заявлений о расставании с парой.
Рождение детей
Подтверждением того, что Алла и Максим счастливы в браке, стало объявление о рождении близнецов: Лизы и Гарри. Дети родились от суррогатной матери. Дети звездной пары родились 18 сентября 2013 года. Новоиспеченный отец находится на седьмом небе от счастья. Он охотно рассказывает публике о своих «сокровищах», об их кормлении и первых успехах. Оказывается, Алла давно хотела второго ребенка, но не могла. 11 лет назад она заморозила яйца в надежде, что они ей пригодятся.Алла подбирала имена детям, Максим их одобрил, так как они хорошо сочетаются с отцом и фамилией.
Долгое время ни журналисты, ни поклонники примадонны российской эстрады не могли поверить в искренность чувств к ней юмориста Максима Галкина. Но, несмотря на все эти пересуды, Максиму удалось доказать всю искренность своих чувств, ведь пара уже почти 8 лет живет счастливым браком.
Но буквально недавно в прессе, несмотря на то, что пара недавно поженилась, начали циркулировать слухи о постоянных скандалах между Галкиным и Пугачевой.Более того, ходят слухи, что известный комик решил бросить жену ради бывшей невесты эпатажного шоумена Сергея Зверева – Елены Галицыной.
Галкин уходит от Пугачевой ради бывшей: история любви пары
По словам примадонны, первые чувства между ней и молодым и малоизвестным на тот момент юмористом Максимом Галкиным возникли еще в 2001 году. И, несмотря на то, что они заявили о себе как пара только в 2009 году, отношения началось намного раньше.Причем намного раньше, чем развод с Филиппом Киркоровым, который произошел в 2005 году.
А именно, отношения начались после смерти отца Максима Галкина в 2002 году. Следующая потеря в жизни юмориста произошла в 2004 году, его мать скончалась на год. И все это время Алла Борисовна его поддерживала. Судя по всему, такая поддержка стала залогом сильных переживаний пары.
Как бы то ни было, но сразу после развода Аллы Пугачевой и Филиппа Киркорова звездная пара стала жить в гражданском браке.Но примадонна долго не решалась об этом рассказать, и лишь спустя четыре года они официально заявили о своих отношениях.
Галкин уходит от Пугачевой ради бывшей: официальные отношения пары
Несмотря на то, что пара объявила о своих отношениях на всю страну, жениться они не спешили. И еще два года они продолжали жить в гражданском браке.
Счастливое празднование состоялось только в конце декабря 2011 года.Единственное, что их отделяло от счастливой семейной жизни, так это отсутствие общих детей. Но счастливые молодожены смогли с этим справиться.
Так, в 2013 году Максим Галкин и Алла Пугачева стали родителями с помощью суррогатной матери, которая родила двойню. По слухам, зачатие произошло от яиц Аллы Борисовны, которые ранее были заморожены. В подтверждение этого можно посмотреть на Гарри и Лизу и убедиться, что близнецы безумно похожи на Аллу Пугачеву.
Ну, а последним и, наверное, самым важным таинством в жизни каждой женщины была свадьба. Произошло это в ноябре прошлого года в одном из подмосковных храмов. После этого ни у кого не осталось сомнений, чтобы не поверить в искренность своих чувств.
Галкин уходит от Пугачевой к бывшей: слухи о разводе
И все же свадьба пары стала не самой шокирующей новостью. Ведь Максим Галкин смог еще больше удивить своих поклонников. Так, в последнее время появляется все больше информации о том, что комик намерен развестись с Аллой Борисовной.
У журналистов есть две причины так думать. Первая причина, которая смогла внушить такие мысли, – это то, что Галкин стал жить в квартире своих родителей. Так что в любом случае он появляется один, а его законная жена находится дома с детьми.
Это стало причиной того, что пресса стала пристально следить за юмористом. И вся эта слежка дала свои результаты. Так, в последнее время Галкина стали замечать в компании бывшей невесты Сергея Зверева – Елены Галицыной. Более того, их совместные фотографии просочились в прессу, и, как уверены поклонники, поездка Галкиной в Минск заключалась в знакомстве с родителями Галициной.
Также журналисты утверждают, что примадонна давно знала об измене своего молодого мужа и даже застала его горячо. А после ссоры, произошедшей недавно в отеле, сама Алла Борисовна призналась, что ее так не предавали.
Новости культуры и искусства
Пугачева и Галкин: разве это развод?
То, о чем СМИ говорили последние полгода и то, что казалось полнейшей чепухой, похоже, сбывается.Различные источники, близкие к первой паре нашего шоу-бизнеса, подтверждают одно: Алла Пугачева и Максим Галкин действительно находятся на грани разрыва.
И дело не в том, что, мол, 37-летний Максим пошутил. Да, я встречался этим летом с моделью из Харькова, Еленой Галицыной, и Пугачева косвенно это подтвердила. Было ли это романтично или дружелюбно – какая разница? Суть проблемы в другом, и коварные любовники тут ни при чем.
В ноябре Максиму и Алле вместе исполнится 12 лет.В декабре – два года с момента вступления в законный брак. Но одно – это полу-загадочная, по крайней мере для репортеров, любовная игра. А семейные отношения совсем другие. К мужу Дивы предъявляются особые требования. И до сих пор ни один из законных супругов певца не встретил их полностью.
Итак, видимо, подошла очередь Галкина. Шутки-анекдоты, к которым Максим более чем готов, уже не такие смешные, джентльменская приятность на светских вечеринках стала повседневной рутиной.Что дома?
А дома, по словам источников, близких к звездной паре, Алла кукует одна. И дело не только в том, что сейчас Галкин снимается в фильме «Короли могут все» – в последние месяцы супруги часто ссорятся, их отношения обострились до предела.
В чем причина? По словам близких, все раздоры в звездной семье – из-за денег. Дескать, Максим стал мало зарабатывать. «Маленький» – это, конечно, по меркам Пугачевой, привыкшей жить на широкую ногу.Количество гастролей Галкина резко сократилось, а зарплаты телеведущей едва хватает на содержание шикарной квартиры в центре города, величественного замка в поселке Грязи и многочисленной прислуги. Но за все капризы Примадонны все равно придется расплачиваться! Что не уменьшается с годами. То есть причина в ней, а не в нем. Дело не только в том, что певицу все чаще видят в Филипповском переулке, где живет ее бывший, но более обеспеченный муж Киркоров.
Многие говорят о несовместимости и неизбежном расставании Галкина и Пугачевой. В том числе экстрасенсы, сексологи и даже графологи.
Диля Еникеева , сексолог:
Уверен на 100%: это брак по расчету, взаимовыгодный союз. Здесь нет сексуальной составляющей. А то, что Пугачева и Галкин узаконили свои отношения, только приблизили свой крах. Поскольку они уже исчерпали все возможности для пиара, брак был своеобразным козырем, который держат в рукаве на случай ЧП.Следующим мощным пиар-ходом может стать только усыновление ребенка. А еще лучше шесть, как Джоли и Питт!
Графолог Татьяна Гогуадзе:
Крупные заглавные буквы в автографе Пугачевой означают капризы, с которыми другим часто приходится приспосабливаться. При этом длинный хвост в конце подписи Галкина – нетерпимость к приказам. И большой полукруг – художник тщательно скрывает одни стороны своей жизни от других. У этого парня есть интимный секрет!
Мохсен Норузи, экстрасенс:
Эти люди по своей натуре не простые романтики – это бизнесмены, активные люди, привыкшие использовать каждую секунду, уверенно идущие к цели и не просчитывающие свои шаги.Но Максим не будет последним звеном в этой цепочке, всех ждет большой сюрприз! Скоро в жизнь Аллы вернется один необычный человек …
Неверов Максим
Фото FOTOBANK.COM
Сама Елена Галицына игнорирует такие разговоры. Опровергать слухи не в ее интересах: такая слава помогает начинающей певице строить карьеру.
Информация о том, что легенда российской сцены певица Алла Пугачева застала своего молодого мужа на измене.Источники, близкие к звездному окружению, утверждают, что движение «влево» за спиной жены продолжалось довольно долго.
Примадонна российской эстрады дала только один комментарий по этому поводу. Выйдя из гостиницы, в которой произошла ссора, Алла Пугачева призналась журналистам, что ее еще не предали.
«Никто меня так не обидел, я расстроена – мне нужен покой», – отчаянно сказала звезда. “Оставьте меня, пожалуйста!” После скандала Алла Борисовна и ее молодой муж разошлись в разные стороны, каждый на своей машине.
Недавно появилась информация о том, что российский художник Максим Галкин, муж Аллы Пугачевой, был замечен в Сочи в компании длинноногой модели. Галкин не стал опровергать эту информацию, однако заявил, что с девушкой связаны только дружеские отношения.
Алла Пугачева вела себя как по-настоящему практичная женщина. Глупо надеяться на вечную любовь Максима Галкина, поэтому примадонна пыталась связать его на законных основаниях. Ничего не вышло.
У Аллы Борисовны тяжелый период.Ранее в этом году она была втянута в судебный процесс с Роспатентом. Несколько месяцев певец пытался вернуть себе в собственность товарный знак Philippe через суд.
Филипп застрял
Знак принадлежал художнику почти 15 лет по 20 классам товаров и услуг. Но осенью прошлого года истек срок правовой защиты торговой марки, о чем Роспатент уведомил звезду, но реакции Пугачевой не последовало, пока самарская компания не посягнула на Филиппа.
Именно тогда певец возмутился и подал в суд. Организация «Филипп», управляющая сетью частных детских садов «Филиппок» в Самаре, попросила лишить этот знак правовой защиты в 41 категории (включает услуги образования, обучения, киностудии, студии звукозаписи и т. Д.).
По закону марки «Филипп» и «Филиппок» считаются идентичными. Алла Борисовна выиграла суд. Теперь Пугачева может назвать в честь поп-короля магазин или похоронное бюро, производить стиральный порошок или даже подушечки.Вернули Пугачевой и 200 рублей, которые в начале производства она должна была заплатить в качестве госпошлины.
Но, отстояв свое законное право и показав, кто в доме хозяин, Алла Пугачева поступила благородно. Она представила товарный знак детскому саду в классификации «образовательные учреждения». Оказывается, теперь она не может назвать в честь бывшего мужа ту вокальную школу, которую он планирует открыть.
Душа и тело
Напомним, еще будучи супругами, Алла и Филипп организовали совместное предприятие «Филип Киркоров Продакшн».В 2002 году компания приобрела права на постановку мюзикла «Чикаго» в России, в который было вложено более 5 миллионов долларов. Затраты не окупились. И все друзья примадонны отговорили ее от этой авантюры.
Кстати, по информации из ближайшего окружения певца, именно это банкротство стало причиной развода супругов. После этого бизнес разделили: продюсерская компания Филиппа Киркорова вместе с долгами осталась у Киркорова.И Пугачева забрала все права на бренд Киркорова. И зарегистрировала его в Alla Art Studio, которую создала еще в апреле 1996 года.
В общем, Алла Борисовна заявила идею патентования товарных знаков Филиппа своему тогдашнему супругу сразу после свадьбы. Киркоров безоговорочно подчинялся своей богине.
Сам виновник спора все это время наблюдал за процессом со стороны. В короткой беседе с корреспондентом «Экспресс-газеты» Филипп Бедросович признался, что «всем сердцем и душой принадлежит Алле Борисовне, а это гораздо важнее какой-то торговой марки.«
Независимо от того,
Судебная тяжба за имя бывшего мужа разыгралась на фоне личной драмы Аллы Борисовны. Полгода назад СМИ впервые написали, что Максим Галкин больше не живет в квартире примадонны в Филипповском переулке.
Конечно, это не первый случай, когда «милые ругаются» – до этого было много причин: ревность и деловые разногласия. Но в старину «перелетный» Галкин всегда возвращался.Совсем недавно в эфире Радио Алла Пугачева приподняла завесу над повседневными отношениями с Галкиным.
– Мы живем как обычные люди! У нас все просто, без пафоса и шика. Мы абсолютно счастливы. Мы живем, как говорится, в полной гармонии! – сказала Алла Борисовна.